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Título: Duplicação cromossômica de bananeira “ouro” com amiprofósmetil e avaliação da estabilidade do conteúdo de DNA
Título Alternativo: Chromosome duplication of banana "ouro" with amiprophos-methyl and evaluation of stability of DNA content
Autor(es): Abreu, Rafael Azevedo Arruda de
Lattes: http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4472657P9
Orientador: Pio, Leila Aparecida Salles
Coorientador: Dias, Gabrielen de Maria Gomes
Membro da banca: Nunes, Claudinéia Ferreira
Membro da banca: Pereira, Roselaine Cristina
Assunto: Musa acuminata Colla
Citometria de fluxo
Melhoramento vegetal
Poliploidização
Antimitótico
Flow cytometry
Plant breeding
Polyploidization
Antimitotic
Data de Defesa: 7-Ago-2015
Data de publicação: 7-Dez-2015
Agência de Fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Referência: ABREU, R. A. A. de. Duplicação cromossômica de bananeira “ouro” com amiprofósmetil e avaliação da estabilidade do conteúdo de DNA. 2015. 45 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2015.
Resumo: Em programas de melhoramento genético de bananeira diversas estratégias são usadas, dentre elas a de duplicação cromossômica in vitro de diploides AA/BB para gerar tetraploides, que posteriormente serão cruzados com diploides melhorados permitindo a criação de triploides secundários AAA/AAB, que se beneficiam do efeito “gigas”. Assim, o presente trabalho tem como objetivo verificar o efeito do Amiprofós-metil (APM) na indução de duplicação de cromossomos em explantes da bananeira “Ouro”, cultivar diploide (AA) que possui características importantes para o melhoramento genético, bem como a estabilidade no conteúdo de DNA das plantas ao longo de 30 dias. O experimento foi realizado no Laboratório de Cultura de Tecidos, situado no Departamento de Agricultura da Universidade Federal de Lavras – UFLA, utilizando como material vegetal explantes de bananeira “Ouro”, diploide (AA), cedidos pela EMBRAPA Mandioca e Fruticultura. Inicialmente os explantes foram estabelecidos in vitro em meio MS suplementado com 2,5 mg L -1 de BAP (6-benzilaminopurina), 30 g L -1 de sacarose, 1,7g L -1 de Phytagel e pH 5,8. Foi utilizado delineamento inteiramente casualizado com 20 tratamentos, que consistem nas 5 diferentes doses de APM e os 4 tempos de exposição do explante ao antimitótico, sendo 13 plantas por parcela. Após estabelecimento in vitro, os explantes foram repicados e transferidos para um novo meio MS suplementado com o antimitótico APM nas seguintes concentrações: 0, 25, 50, 75 e 100 µM, onde permaneceram por 2, 4, 6 e 8 dias. Após o tempo de exposição dos explantes ao APM, os mesmos foram transferidos para um novo meio MS e foram mantidos até o momento das análises de citometria de fluxo, realizadas 30 e 60 dias após a última transferência de meio para identificação das plantas com o conteúdo de DNA duplicado. Após a análise em citômetro de fluxo da primeira leitura, observaram-se 204 plantas diploides (78,5%), 30 mixoploides (11,5%), 5 tetraploides (1,9%) e 21 plantas mortas ou sem área foliar suficiente para análise (8,1%). Na segunda análise de citometria observaram-se 183 plantas diploides (70,4%), 23 mixoploides (8,9%), 4 tetraploides (1,5%) e 50 plantas mortas/sem folha (19,2%); percebe -se maior mortalidade no tempo de exposição de 4 dias e nas concentrações mais altas. O tratamento de concentração 75 µM por 6 dias gerou maior número de plantas com material genético duplicado, além de manter estável o conteúdo de DNA ao longo do tempo estudado.
Abstract: In banana breeding programs several of strategies are used, among them the diploid in vitro chromosomic duplication AA/BB to generate tetraploid, which posteriorly they are crossed with improved diploid allowing the creation of secondary triploids AAA/AAB, that benefit from the "gigas" effect. Therefore, the present study aims to evaluate the effect of Amiprophos-methyl (APM) in the induction of chromosomes duplication in explants of banana "Ouro", diploid cultivar that has important features for genetic improvement, as well as the genetic stability of the DNA content of the plants over 30 days. The experiment was conducted at Tissue Culture Laboratory, located in the Department of Agriculture of the Federal University of Lavras – UFLA, utilizing explants of banana “ouro” as plant material, diploid (AA), donated by EMBRAPA Mandioca e Fruticultura. Initially, the explants were established in vitro on MS medium supplemented with 2,5 mg L -1 of BAP (6-benzylaminopurine), 30 g L -1 of sucrose, 1,7g L -1 of Phytagel and pH 5,8. Completely randomized design was used with 20 treatments, consisting of the 5 different doses of APM and 4 times of exposure of explants to antimitotic, with 13 plants per plot. After the in vitro establishment, the explants were cut and transferred to a new MS medium supplemented with antimitotic APM in the following concentrations: 0, 25, 50, 75 and 100 µM, where they remained for 2, 4, 6 and 8 days. After the exposure time of the explants at APM, these were transferred to a new MS medium where they were kept until the moment of the flow cytometry analysis, performed 30 and 60 days after the last medium transfer for identifying plants with duplicated DNA content. After the flow cytometer analysis in the first reading, it was observed 204 diploids plants (78.5%), 30 mixoploids (11.5%), tetraploids 5 (1.9%) and 21 dead plants or no leaf area enough for analysis (8.1%). In analysis of second reading were observed 183 diploids plants (70.4%), 23 mixoploids (8.9%), tetraploids 4 (1.5%) and 50 dead plants or no leaf area enough for analysis (19.2%); realize a higher mortality in the exposure time of four days and at higher concentrations. Treatment of concentration 75 µM for 6 days afforded higher numbers of plants with genetic material duplicated, besides maintaining stable DNA content along the studied time.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/10645
Publicador: Universidade Federal de Lavras
Idioma: por
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