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Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/10703

Title: Óleos essenciais de três espécies de myrtaceae:composição química, atividades antioxidante, hemolítica, antitumoral, antiocratoxigênica e citogenotóxica
???metadata.dc.creator???: Santiago, Juliana de Andrade
???metadata.dc.contributor.advisor1???: Cardoso, Maria das Graças
???metadata.dc.contributor.referee1???: Nelson, David Lee
???metadata.dc.contributor.referee2???: Vieira, Larissa Fonseca Andrade
???metadata.dc.contributor.referee3???: Guimarães, Luiz Gustavo de Lima
???metadata.dc.contributor.referee4???: Ionta, Marisa
???metadata.dc.contributor.referee5???: Soares, Marisi Gomes
Keywords: Produtos naturais
Antitumoral
Hemólise
Antioxidante
Citogenotoxicidade
Ocratoxina
Natural products
Antitumor
Hemolysis
Antioxidant
Cytogenotoxicity
Ochratoxin
???metadata.dc.date.submitted???: 28-Sep-2015
Issue Date: 17-Dec-2015
???metadata.dc.description.sponsorship???: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Citation: SANTIAGO, J. de A. Óleos essenciais de três espécies de myrtaceae: composição química, atividades antioxidante, hemolítica, antitumoral, antiocratoxigênica e citogenotóxica. 2015. 222 p. Tese (Doutorado em Agroquímica)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2015.
???metadata.dc.description.resumo???: Objetivou-se neste estudo determinar a composição química e várias atividades biológicas dos OEs de Melaleuca alternifolia (folhas e frutos), Melaleuca quinquenervia (folhas e frutos) e Backhousia citriodora (folhas). Os OEs foram extraídos pela técnica de hidrodestilação e caracterizados quimicamente por CG/EM e CG-DIC. Os testes antitumorais foram realizados em cinco linhagens celulares derivadas de tumores humanos: A549, MCF7, HepG2, U251-MG e HT144. A frequência de células apoptóticas foi analisada por microscopia de fluorescência; as alterações morfológicas, por microscopia de contraste e o conteúdo de DNA, nas diferentes fases do ciclo celular, por citometria de fluxo. Adicionalmente, foram realizados vários ensaios para a avaliação da atividade antioxidante (métodos ABTS, DPPH, radical hidroxil, β- caroteno/ácido linoleico, TBARS e complexo fosfomolibdênio). A atividade hemolítica foi avaliada em meio líquido (Ht 0,15%) e em meio sólido. Os óleos extraídos das folhas foram avaliados quanto à inibição da produção de ocratoxina A por Aspergillus carbonarius e A. niger sob duas condições distintas, 15 e 25ºC. Os efeitos citogenotóxicos do óleo essencial (OE) de B. citriodora foram avaliados sobre Lactuca sativa, utilizando ensaios citogenéticos, eletroforese em gel de agarose, citometria de fluxo e teste de TUNEL. Os constituintes majoritários encontrados no OE das folhas de M. alternifolia foram γ-terpineno (19,30%) e terpinen-4-ol (56,80%) e, no óleo dos frutos, ρ-cimeno (29,48%) e terpinen-4-ol (61,29%). O OE das folhas de M. quinquenervia apresentou como constituintes majoritários os compostos α- pineno (61,37%) e linalol (22,08%), ao passo que, no óleo dos frutos, foram identificados esses mesmos compostos, mas em proporções distintas; α-pineno (34,49%) e linalol (13,72%), acrescidos de outros componentes; ρ-cimeno (17,99%) e 1,8-cineol (11,24%). No OE de B. citriodora, foi encontrado o citral (91,19%) como constituinte principal. Analisando a atividade antitumoral, pôdese observar que o OE dos frutos de M. alternifolia reduziu o percentual de células viáveis em 10 e 11%, nas concentrações de 100 e 200 µg mL-1 , respectivamente. O OE de B. citriodora induziu alterações significativas na distribuição das células de linhagens neoplásicas nas diferentes fases do ciclo celular, somada a um aumento de células apoptóticas e alterações morfológicas das células. O OE das folhas de M. alternifolia apresentou maior atividade antioxidante perante os métodos fosfomolibdênio (0,84 µg µg-1 de ácido ascórbico) e hidroxil (9,7 a 58,9%), sendo, juntamente com os demais óleos de Melaleuca, ineficazes para os outros métodos. O OE de B. citriodora mostrou-se eficiente ao se utilizar os métodos TBARS (47,9 a 56,3%) e fosfomolibdênio (0,81 µg µg-1 de ácido ascórbico). Também apresentou efeitos clastogênicos e aneugênicos em células de L. sativa; induziu alterações no ciclo celular e no conteúdo de DNA, além de ativar a morte das células expostas. Verificou-se que os OEs apresentaram atividade hemolítica em diferentes concentrações, perante ambas as metodologias, com exceção dos OEs de M. quinquenervia, que não ocasionaram hemólise em meio sólido. Os OEs também induziram a redução da síntese de ocratoxina por A. carbonarius e A. niger. Assim, os resultados obtidos ampliam o potencial de aplicação dos óleos essenciais de B. citriodora, M. alternifolia e M. quinquevervia.
Abstract: The aim of this study was to determine the chemical composition and various biological activities of the essential oils from Melaleuca alternifolia (leaves and fruits), Melaleuca quinquenervia (leaves and fruits), and Backhousia citriodora (leaves). The EOs were extracted through the hydrodistillation technique and chemically characterized by GC/MS and GC-FID. The antitumor tests were performed in five cell lines derived from human tumors: A549, MCF7, HepG2, U251-MG and HT144. The frequency of apoptotic cells was analyzed by fluorescence microscopy; morphological changes through contrast microscopy, and DNA content, in the different phases of the cell cycle, through flow cytometry. In addition, several tests were performed to evaluate the antioxidant activity (ABTS, DPPH, hydroxyl radical, β-carotene/ linoleic acid, TBARS , and phosphomolybdenum complex). Hemolytic activity was evaluated in liquid medium (0.15% Ht) and solid medium. The oils extracted from the leaves were evaluated for inhibition of ochratoxin production by Aspergillus niger and A. carbonarius under two different conditions, 15 to 25°C. The cytogenotoxic effects of the essential oil (EO) from B. citriodora were evaluated on Lactuca sativa, using cytogenetic assays, agarose gel electrophoresis, flow cytometry and TUNEL test. According to chromatographic analysis, the major constituents found in the EO from the leaves of M. alternifolia were γ-terpinene (19.30%) and terpinen-4-ol (56.80%), and the oil from the fruit, ρ-cymene (29.48%) and terpinen-4-ol (61.29%). The EO from M. quinquenervia leaves showed as major constituents the compounds α-pinene (61.37%) and linalool (22.08%) while in the fruits the same compounds have been identified, but in different proportions: α-pinene (34.49%) and linalool (13.72%), plus other components; ρ-cymene (17.99%) and 1,8-cineole (11.24%). In EO from B. citriodora citral was found (91.19%) as the main constituent. Analyzing the antitumor activity, it was observed that the fruit EO from M. alternifolia reduced the percentage of viable cells in 10 and 11% at concentrations of 100 and 200 µg mL-1 , respectively. The EO from B. citriodora induced significant changes in the distribution of neoplastic cell lines in different phases of the cell cycle, in addition to an increase of apoptotic cells and morphological change of the cells. The EO from the leaf of M. alternifolia showed a higher antioxidant activity to the methods phosphomolybdenum (0.84 µg µg-1 ascorbic acid) and hydroxyl (from 9.7% to 58.9%), and were, along with other oils from Melaleuca, ineffective through the other methods. The EO from B. citriodora showed efficient when using the TBARS methods (47.9 to 56.3%) and phosphomolybdenum (0.81 µg µg -1 ascorbic acid). The oil also showed clastogenic and aneugenic effects on L. sativa cells; induced changes in cell cycle and DNA content, in addition to activating the death of the treated cells. It was found that EOs had hemolytic activity at different concentrations to both methods, except the EOs from M. quinquenervia, which did not cause hemolysis in a solid medium. The EOs also induced the reduction of synthesis of ochratoxin by A. carbonarius and A. niger. Thus, the results expand the potential application of essential oils from B. citriodora, M. alternifolia and M. quinquevervia.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/10703
Publisher: Universidade Federal de Lavras
???metadata.dc.language???: por
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