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Título: Estratégias para obtenção de duplo – haploides e progênies indutoras de haploidia em milho
Título Alternativo: Strategies for obtaining double haploids and haploid inducing progenies in maize
Autor(es): Ribeiro, Camila Bastos
Orientador: Souza, João Cândido de
Membro da banca: Santos, João Bosco dos
Membro da banca: Abreu, Ângela de Fátima Barbosa
Membro da banca: Bueno Filho, Júlio de Sousa
Membro da banca: Faria, Marcos Ventura
Assunto: Citometria de fluxo
Zea mays
Haploides
Simple Sequence Repeats (SSR)
Flow citometry
Haploids
Data de Defesa: 7-Jun-2016
Data de publicação: 27-Jul-2016
Agência de Fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Referência: RIBEIRO, C. B. Estratégias para obtenção de duplo – haploides e progênies indutoras de haploidia em milho. 2016. 113 p. Tese (Doutorado em Genética e Melhoramento de Plantas)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2016.
Resumo: Uma das limitações da produção de linhagens duplo - haploides in vivo é realizar uma identificação de haploides com baixa frequência de falsos positivos e posterior duplicação cromossômica. A obtenção de indutores de haploidia com elevadas taxas de indução, também, é um ponto bastante importante que facilita muito a utilização dessa tecnologia. O objetivo deste estudo foi identificar haploides pelo marcador R-navajo, comprimento e coloração da raiz, vigor de plantas, citometria de fluxo, contagem cromossômica e marcadores moleculares microssatélites e, também, obter linhagens duplo - haploides. Além disso, foram avaliadas 14 progênies S0:1 e 7 progênies S2:3 de milho quanto à taxa de indução de haploidia, para comparar a seleção de indivíduos por diferentes estratégias, envolvendo a seleção entre, entre e dentro e somente dentro das progênies indutoras, bem como o efeito da seleção indireta para plantas com endosperma roxo na indução de haploides. Os experimentos foram conduzidos na área experimental do Departamento de Biologia da UFLA, em Lavras-MG, nos anos agrícolas 2012/2013 e 2014/2015. Foi conduzido um experimento em cada safra e o delineamento utilizado, em ambos, foi o inteiramente casualizado, com uma e duas repetições, na safra 2012/2013 e 2014/2015, respectivamente. Foram avaliadas as características indução de haploidia e endosperma roxo, das progênies em cruzamento com o híbrido simples GNZ9501. Foram obtidos 552 e 260 haploides, na safra 2012/2013 e 2014/2015, respectivamente. Os haploides identificados por citometria foram submetidos a um protocolo de duplicação cromossômica. Depreende-se que marcadores morfológicos podem resultar em uma alta proporção de falsos positivos na identificação de haploides. O uso da citometria de fluxo e de marcadores moleculares codominantes de DNA são os mais recomendados para a confirmação dos haploides. Foi possível a obtenção de linhagens duplo- haploides com o protocolo utilizado. As progênies 2 e 6 se mostraram efetivas na indução de haploides em ambas as safras. A seleção entre e dentro de progênies para haploides e, também, para plantas com endosperma roxo apresentaram maiores ganhos genéticos para a indução de haploidia.
Abstract: One of the limitations of the double haploid lines development in vivo is to perform a haploid identification with low frequency of false positives and subsequent chromosome duplication. Obtaining haploid inductors with high induction rates is also a very important point that greatly facilitates the use of this technology. The aim of this study was to identify the haploid R-Navajo marker, length and root color, vigor of plants, flow cytometry, chromosome counting and microsatellite markers and also obtain double haploid lines. In addition, we evaluated 14 S0:1 progenies and seven S2:3 progenies of maize in relation to their haploid induction rate. After that we compared the selection of individuals for different strategies involving selection among, between and within and only within progenies and also the effect of indirect selection for plants with purple endosperm instead of the haploid induction. The experiments were conducted in the experimental area of the Biology Department of UFLA in Lavras, Minas Gerais, in the agricultural years 2012/2013 and 2014/2015. An experiment was conducted in each year, and the design used in both was completely randomized, with one and two replications in the 2012/2013 and 2014/2015, respectively. The haploid and purple induction were evaluated in the cross between the progenies and the simple hybrid GNZ9501. We found 552 and 260 haploid in 2012/2013 and 2014/2015, respectively. The haploid identified by flow cytometry, were subjected to a chromosome doubling protocol. It appeared that morphological markers can result in a high proportion of false positives in haploid identification. The use of flow cytometry and DNA codominant molecular markers, are the most recommended for haploid confirmation. It was possible to obtain a double-haploid line with the protocol used. Progenies 2 and 6 proved effective in haploid induction in both years. The selection among and within progenies for haploid and purple induction showed higher genetic gains.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/11464
Publicador: Universidade Federal de Lavras
Idioma: por
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