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Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/2608

Title: Caracterização de isolados de Potato virus Y (PVY) de Minas Gerais e avaliação da disseminação do vírus e de resíduos de inseticidas em tubérculos de batata após o controle de vetores
Other Titles: Characterization of Potato virus Y (PVY) isolates and evaluation of virus dissemination and of insecticides residues in potato tubers after vector control
???metadata.dc.creator???: Rabelo Filho, Francisco de Assis Câmara
???metadata.dc.contributor.advisor1???: Figueira, Antonia dos Reis
???metadata.dc.contributor.referee1???: Souza, Ricardo Magela de
Pádua, Joaquim Gonçalves de
???metadata.dc.description.concentration???: Virologia Vegetal
Keywords: PVY
Disseminação
Inseticidas
Caracterização molecular
Resíduos de inseticidas
???metadata.dc.date.submitted???: 4-Jul-2008
Issue Date: 12-Aug-2014
Citation: RABELO FILHO, F. de A. C. Caracterização de isolados de Potato virus Y (PVY) de Minas Gerais e avaliação da disseminação do vírus e de resíduos de inseticidas em tubérculos de batata após o controle de vetores. 2008. 101 p. Dissertação (Mestrado em Fitopatologia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2008.
???metadata.dc.description.resumo???: Com a importação de sementes de diversos países, pelo Brasil e devido ao meio de propagação vegetativa da batata, a ocorrência de vírus no campo é dinâmica e freqüentemente aparecem novos isolados mais agressivos e mais facilmente dissemináveis no campo. Assim sendo, cada vez mais têm sido utilizados inúmeros produtos inseticidas para o controle dos vetores que disseminam esses vírus no campo, com riscos constantes de deixar nos tubérculos resíduos nocivos à saúde humana. Neste trabalho fez-se um levantamento nas principais regiões produtoras do estado de Minas Gerais, com a finalidade de caracterizar, biológica e molecularmente, os isolados virais presentes no campo na safra de 2007. Na caracterização biológica, foram utilizadas espécies de três famílias botânicas: Solanaceae, Amaranthaceae e Chenopodiaceae, com enfoque especial às espécies de fumo Nicotiana tabacum cv. TNN e N. tabacum cv. White Burley, por serem geralmente empregadas na distinção das estirpes do PVY. A caracterização molecular foi feita empregando-se um conjunto de primers específicos para diferenciação de isolados por RT-PCR e um par de primers desenhados para amplificar o gene da capa protéica, que foi seqüenciada e analisada. A comparação entre as seqüências de nucleotídeos e de aminoácidos foi feita com 24 isolados de PVY, escolhidos entre os disponíveis no GenBank. Foi também realizado um experimento de campo, seguindo o manejo adotado por produtores de batata consumo para o controle químico de vetores, avaliando-se, posteriormente, a ocorrência de resíduos nos tubérculos de batata produzidos. Foram utilizados dois tratamentos de sulco combinados com quatro diferentes inseticidas para pulverizações foliares e uma testemunha, sem tratamento. As plantas de Gomphrena globosa, Datura stramonium, Chenopodium quinoa e Nicandra physaloides foram imunes a todos os catorze isolados e as demais espécies inoculadas apresentaram sintomas cuja severidade variou com o isolado inoculado. Os resultados dos testes biológicos, de PCR e os do seqüenciamento mostraram que todos os isolados de PVY pertenciam à estirpe necrótica, sendo que metade delas se tratava do variante PVYNTN. Comparando-se à seqüência de nucleotídeos, as identidades entre os 14 isolados variaram entre 87% e 99%. Entre esses e os isolados do GenBank, a variação foi de 86% a 99%. O mesmo foi observado quando os isolados do GenBank foram comparados entre si. No alinhamento múltiplo de aminoácidos, a identidade entre os 14 isolados brasileiros foi de 83% a 98% e entre esses e os do GenBank foi de 86% a 99%. A identidade entre os isolados do GenBank ficou entre 91% e 100%. As árvores filogenéticas construídas com base no alinhamento de nucleotídeos e de aminoácidos mostraram uma distribuição dos isolados brasileiros em dois grupos distintos, um contendo os PVYNTN (SGT-AG, TAP-AG, SAT-AG, IPU-MA, ALF-VI, ARA-MO e COR-AG) e outro, os isolados PVYN (MFE-AG, BRE-EM, LUM-CE, FOR-AG, SGS-AG, LAV-CL e POL-AG). Quando os nucleotídeos e os aminoácidos foram alinhados com os 24 isolados do GenBank, ALF-VI, ARA-MO e COR-AG formaram um clado distinto dentro do grupo dos PVYNTN e BRE-EM e MFE-AG no grupo da estirpe necrótica comum, mostrando distanciamento entre eles e os demais. Os dados indicaram que a variante NTN está aumentando a sua ocorrência em diversas partes do estado, o que acarreta prejuízos maiores, por causarem anéis necróticos nos tubérculos, depreciando-os para o comércio. No teste com os inseticidas, os diferentes tratamentos não impediram a disseminação do PVY no campo, provavelmente devido ao alto índice inicial de vírus nas sementes. Isso demonstra a importância de se empregar sementes livres de vírus para o estabelecimento da cultura. Os diversos tratamentos não deixaram resíduos nos tubérculos, indicando que a concentração do inseticida indicada pelo fabricante é segura para o consumidor.
Due to the Brazilian import of potato seeds from several countries, associated with the vegetative propagation of potato plants, the occurrence of virus in the field is quite dynamic. It often allows the appearance of new and more aggressive virus isolates, which besides increasing the tuber losses spreads damages more easily in the field. Therefore, the use of several chemical insecticides to control the virus vectors has increased, making the risk of insecticides residue higher, unsafe for human and animal healthy, remaining on the potato tubers. This work carried out a survey in the main potato field regions of Minas Gerais State- Brazil, with the purpose of characterizing biologically and molecularly the virus isolates infecting potato plants in the year of 2007. In the biological characterization species of three botanic families were used: Solanaceae, Amaranthaceae and Chenopodiaceae, with a special focus on the tobacco species: Nicotiana tabacum cv. TNN and N. tabacum cv. White Burley because they have been employed to discriminate PVY strains. The molecular characterization was done by using a set of primers, specific for PVY strain discrimination by RT-PCR, and a pair of primers settled to amplify the coat protein gene, which was sequenced and analyzed. The comparison of the nucleotides and amino acids sequences was done with 24 PVY isolates, chosen among those available in GenBank. A field experiment was also carried out, following the techniques adopted by potato growers for the chemical control of virus vectors, in order to evaluate the virus spread and the occurrence of residue on potato tubers produced. The experiment was accomplished with potato cultivar Agata, using two soil treatments combined with four different insecticides for leaves spraying, and one control without any treatment. The Gomphrena globosa, Datura stramonium, Chenopodium quinoa and Nicandra physaloides plants were immune to all of the fourteen isolates. The symptoms shown by other inoculated species had different severity degrees, which changed according to the inoculated virus isolate. The results of the mechanical inoculation, PCR and coat protein gene analysis showed that all the fourteen studied PVY isolates were necrotic strain, but half of them was a PVYNTN variant. Comparing the nucleotide sequence, the identities among the 14 isolates ranged between 87 and 99%. When compared with the PVY isolates from GenBank, the variation was between 86% and 99%. The same was found when the GenBank isolates were compared among themselves. The identity of amino acids among Brazilian isolates ranged from 83% to 98% and among them and the GenBank PVY isolates was between 86% and 99%. The identity among the GenBank PVY isolates was between 91% and 100%. The phylogenetic trees based on nucleotide and amino acid sequences showed a distribution of the Brazilian isolates into two distinct groups, one containing PVYNTN (SGT-AG, TAP-AG, SAT-AG, IPU-MA, ALF-VI, ARA-MO and COR-AG) and the other PVYN isolates (MFE-AG, BRE-EM, LUM-CE, FOR-AG, SGS-AG, LAV-CL and POL-AG). When both nucleotide and amino acid sequences were aligned with the 24 GenBank isolates, ALF-VI, ARA-MO and COR-AG isolates joined distinct subgroups within PVYNTN group. BRE-EM and MFE-AG joined the group of the necrotic strain, but were distant from the other Brazilian PVY isolates. The data pointed out that the occurrence of PVYNTN variant has increased in several parts of Minas Gerais State, which brings about greater losses because it induces necrotic rings on the tubers, making them improper for commercialization. In the test with the insecticides, the different treatments did not prevent the spread of PVY in the field, probably because of the high virus incidence on the seeds. It demonstrates the importance of potato virus-free seeds to guarantee the crop profitability. The several insecticide treatments have left no residue on the tubers suggesting that the insecticides concentration advised by the manufacturer is safe to the consumer.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/2608
Publisher: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
???metadata.dc.language???: pt_BR
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