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dc.creatorDiogo Junior, Rubens-
dc.date.accessioned2018-08-29T15:33:34Z-
dc.date.available2018-08-29T15:33:34Z-
dc.date.issued2018-08-29-
dc.date.submitted2018-02-27-
dc.identifier.citationDIOGO JUNIOR, R. Expressão de genes codificantes para proteínas de choque térmico em sementes de linhagens de milho. 2018. 63 p. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia Vegetal)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2018.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/30240-
dc.description.abstractAmong the proteins that confer the thermotolerance capacity to maize seeds, it stands out the heat shock proteins (HSP's), belonging to the class of dehydrins that, in turn, constitute the second LEA proteins group, recognized for their participation in the response to different kinds of stresses in plants. HSP's act in the assembly of multiprotein complexes, in the appropriate transport of proteins to their target subcellular compartment, in the control and signaling of the cell cycle, in the protection of cells against high temperatu re stress, and against an eventual apoptosis. In view of this, the objective of this work was to quantify the expression of genes coding for heat shock proteins in seeds of maize lineages with different tolerance levels at high drying temperatures. After r eviewing the literature, 37 genes coding for HSPs and for other proteins acting on high temperature response metabolism were selected, so for each gene a specific primer pair was designed. Seeds of ten maize lines, belonging to Geneseeds Recursos Genéticos Ltda® and pre-identified as contrasting with respect to tolerance to high drying temperatures, were multiplied and submitted to two drying treatments: 35º C and 50º C. After being submitted to the evaluation of the physiological quality, through the germination test, first count, cold test, and accelerated aging test, the genotypes were classified into two different groups: tolerant and non-tolerant to high applied drying temperature. Six contrasting inbred lines for this characteristic, three of each grou p, were submitted to a polymorphism analysis through the conventional PCR technique, using the 37 pairs of primers previously synthesized. Among these, ten showed some degree of polymorphism between the two groups of genotypes, evidencing some function in the metabolism of response to high drying temperatures. These ten pairs of primers, along with five other reference gene candidate primers, had their efficiencies tested through the Real Time PCR technique. Among these, three pairs of target genes primers met the required conditions: efficiency ranging from 80% to 100%, and single peak on the Melting curve. So then had their relative expressions calculated. It was observed that, after the application of the high drying temperature, the HSP 26 and HSP 70-74-B genes increased their expression levels in all the materials analyzed in both the tolerant and non -tolerant lineages. For the HSP 70-74-A gene, a different pattern of expression profile change was observed between control (drying at 35 ° C) and the high temperature treatment (drying at 50 ° C): their expression levels increased at the tolerante genotypes (L64 and L63), whereas in the non -tolerant materials (L30 and L57) this expression was reduced. It is inferred, therefore, that the expression of this gene is associated with the acquisition of thermotolerance in corn seeds. Thus, it is concluded that the 3 genes evaluated during all stages of these experiments have an effective participation in the metabolism of stress response by high drying temperatures .pt_BR
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)pt_BR
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Lavraspt_BR
dc.rightsacesso abertopt_BR
dc.subjectMarcadores molecularespt_BR
dc.subjectTranscriptômicapt_BR
dc.subjectEstresse abióticopt_BR
dc.subjectSementes de milho - Termotolerânciapt_BR
dc.subjectMolecular markerspt_BR
dc.subjectTranscriptomicpt_BR
dc.subjectAbiotic stresspt_BR
dc.subjectCorn Seeds - Thermotolerancept_BR
dc.titleExpressão de genes codificantes para proteínas de choque térmico em sementes de linhagens de milhopt_BR
dc.title.alternativeExpression profile of genes encoding heat shock proteins in seeds of corn inbred linespt_BR
dc.typedissertaçãopt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia Vegetalpt_BR
dc.publisher.initialsUFLApt_BR
dc.publisher.countrybrasilpt_BR
dc.contributor.advisor1Von Pinho, Édila Vilela de Resende-
dc.contributor.advisor-co1Santos, Heloisa Oliveira dos-
dc.contributor.referee1Von Pinho, Édila Vilela de Resende-
dc.contributor.referee2Santos, Heloisa Oliveira dos-
dc.contributor.referee3Silva, Edvaldo Aparecido Amaral da-
dc.description.resumoDentre as proteínas que conferem a capacidade de termotolerância às sementes de milho, destacam-se as proteínas de choque térmico (HSP’s), pertencentes à classe das deidrinas que, por sua vez, constituem o grupo dois das proteínas LEA, reconhecidas por participarem na resposta a diversos tipos de estresses em plantas. As HSP’s atuam na montagem de complexos multiproteicos, no transporte de proteínas para o compartimento subcelular de destino, no controle e sinalização do ciclo celular, na proteção das células contra estresse por altas temperaturas, e contra uma eventual apoptose decorrente. Diante disto, objetivou-se, com o presente trabalho, quantificar a expressão de genes codificantes para proteínas de choque térmico em sementes de linhagens de milho com diferentes níveis de tolerância a altas temperaturas de secagem. Após revisão de literatura, foram selecionados 37 genes codificantes para HSP’s e para outras proteínas atuantes no metabolismo de resposta às altas temperaturas e, para cada gene, foi desenhado um par de primers específico. Sementes de dez linhagens de milho, pertencentes à Geneseeds Recursos Genéticos Ltda ® e pré-identificadas como contrastantes em relação à tolerância a altas temperaturas de secagem, foram multiplicadas e submetidas a dois tratamentos de secagem: 35º C e 50º C. Após serem submetidas à avaliação da qualidade fisiológica, por meio dos testes de germinação, primeira contagem de germinação, teste de frio, e envelhecimento acelerado, as linhagens foram classificadas em dois grupos: tolerantes e não-tolerantes à alta temperatura de secagem aplicada. Seis linhagens contrastantes para esta característica, sendo três de cada grupo, foram submetidas a uma análise de polimorfismo por meio da técnica de PCR Convencional, utilizando-se os 37 pares de primers previamente sintetizados. Dentre estes, 10 demonstraram algum grau de polimorfismo entre os dois grupos de linhagens, evidenci ando alguma função no metabolismo de resposta às altas temperaturas de secagem. Estes 10 pares de primers, juntamente com 5 primers candidatos a genes de referência, tiveram suas eficiências testadas por meio da técnica de PCR em Tempo Real. Dentre estes, 3 pares de primers dos genes-alvos atenderam às condições de eficiência, entre 80% e 100%, e de pico único na curva de Melting, e então tiveram suas expressões relativas calculadas. Observou-se que os genes HSP 26 e HSP 70-74-B tiveram, sob condições de estresse, aumento significativo dos seus níveis de expressão em todos os materiais analisados, tanto no grupo de linhagens tolerantes quanto no das não tolerantes. Para o gene HSP 70-74-A, ficou evidenciado um padrão diferente quanto à mudança do perfil de expressão entre o tratamento controle (secagem a 35º C) e aquele sob altas temperaturas (50º C), já que seus níveis de expressão aumentaram após a secagem sob alta temperatura nos materiais considerados tolerantes (L64 e L63), enquanto que, naqueles materiais não-tolerantes (L30 e L57), houve redução desta expressão. Infere -se, portanto, que a expressão deste gene está associada à aquisição de termotolerância em sementes de milho. Assim sendo, conclui-se que os 3 genes avaliados durante todas as etapas deste s experimentos têm participação efetiva no metabolismo de resposta ao estresse por altas temperaturas de secagem.pt_BR
dc.publisher.departmentNão especifica vinculação com nenhum departamentopt_BR
dc.subject.cnpqCiências Agráriaspt_BR
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9945813559274320pt_BR
Appears in Collections:PPBV - Biotecnologia Vegetal - Mestrado (Dissertações)



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