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Título: Soluções crioprotetoras para embriões de curimba - Prochilodus lineatus e zebrafish - Danio rerio
Autor : Paula, Daniella Aparecida de Jesus
Primeiro orientador: Murgas, Luis David Solis
Primeiro membro da banca: Drummond, Cristina Delarete
Órfão, Laura Helena
Victorio, Sheila Cristina da Silva
Machado, Mônica Rodrigues Ferreira
Área de concentração: Produção Animal
Palavras-chave: Peixe - Embrião - Conservação
Peixe - Crioprotetor
Peixe - Reprodução
Peixe - Morfologia
Nanotubo de carbono
Fish
Cryoprotectant
Conservation
Carbon nanotube
Reproduction
Data da publicação: 2014
Agência(s) de fomento: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Referência: PAULA, D. A. de J. Soluções crioprotetoras para embriões de curimba - Prochilodus lineatus e zebrafish - Danio rerio. 2013. 149 p. Tese (Doutorado em Zootecnia - Produção Animal) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2014.
Resumo: O resfriamento/congelamento de embriões de peixes permite diversas aplicações práticas e de conservação da biodiversidade, entretanto, novas substâncias devem ser testadas a fim de melhorar os resultados desse processo e obter o sucesso na criopreservação. Diante disso, foram desenvolvidos estudos com diferentes substâncias e os resultados divididos em artigos científicos. Objetivou-se, no primeiro artigo submeter embriões de Prochilodus lineatus às incubadoras experimentais com soluções de álcool polivinílico, hidroxietilcelulose (HEC), gelatina e soro fetal bovino combinadas ao dimetilsulfóxido (DMSO) ou etilenoglicol e determinar a combinação de crioprotetores menos tóxica e sua influência na morfometria dos embriões, além de comparar a eficiência de incubadoras experimentais com as incubadoras tipo funil, pela temperatura, oxigênio e taxa de fertilização das mesmas. A maior porcentagem de embriões viáveis observada foi em 3% de DMSO e 1% de HEC, e os embriões foram influenciados quanto a sua morfometria pelos crioprotetores. Observou-se que as incubadoras experimentais podem ser utilizadas como modelos experimentais pois, a taxa de fertilização não foi influenciada. Objetivou-se, no segundo artigo, submeter embriões de Danio rerio às soluções contendo HEC ou sacarose (SAC) combinadas ao DMSO e determinar a combinação de crioprotetores menos tóxica e sua influência no resfriamento (0°C) e na morfometria dos embriões. A porcentagem média de eclosão, de larvas anormais e as análises morfométricas foram influenciadas pelos tempos de exposição no resfriamento e no teste de toxicidade. Foram observados edema do pericárdio e do saco vitelínico e má formação axial em todos os tratamentos. A HEC e a SAC combinadas ao DMSO podem ser utilizadas durante 2h de resfriamento a 0°C, mantendo a porcentagem de eclosão média de 60%. Objetivou-se, no terceiro artigo, submeter embriões de P. lineatus à soluções com DMSO, SAC e nanotubos de carbono (NTCs) e avaliar sua influência na viabilidade das larvas, na morfometria dos embriões e na criopreservação dos mesmos. NTCs associados ao DMSO e a SAC não foram tóxicos aos embriões de curimba, porém influenciaram as análises morfométricas e não foram suficientes em protegê-los durante o congelamento e descongelamento, pois, às 3h pós-descongelamento nenhum embrião sobreviveu. NTCs adentraram os embriões e mantiveram alta porcentagem de embriões íntegros.
The cooling/freezing of fish embryos allows many practical and biodiversity conservation applications, however, new substances must be tested in order to improve the results of this process and obtain success in cryopreservation. Therefore, we developed studies with different substances, and the results were divided into three scientific articles. The objectives of the first article were to submit Prochilodus lineatus embryos to experimental incubators with polyvinyl alcohol, hydroxyethyl cellulose (HEC), bovine fetal serum and gelatin solutions combined with dimethyl sulfoxide (DMSO) or ethylene glycol and determine the least toxic combination of cryoprotectants and its influence on embryo morphometry, as well as compare the efficiency of experimental incubators with funnel type incubators by temperature, oxygen and fertilization rate of the same. The highest percentage of viable embryos observed was 3% DMSO and 1% HEC, and the embryos were influenced in their morphometry by the cryoprotectants. We verified that the experimental incubators may be used as experimental models because the fertilization rate was not affected. The objectives of the second article were to submit Danio rerio embryos to solutions containing HEC and sucrose (SUC) combined with DMSO, and determine the least toxic combination of cryoprotectants and its influence on cooling (0°C) and embryo morphometry. The average hatching rate of abnormal larvae and the morphometric analysis are influenced by the exposure times in cooling and in the toxicity test. We observed pericardial edema, edema of the yolk sac and axial malformation in all treatments. The HEC and SUC combined with the DMSO may be utilized for 2h of cooling at 0°C, maintaining the average hatching percentage of 60%. The objectives of the third article were to submit Prochilodus lineatus embryos to solutions containing DMSO, SUC and carbon nanotubes (CNTs), and evaluated its influence on larvae viability, embryo morphometry and cryopreservation. CNTs associated with DMSO and SUC were not toxic to curimba embryos, however, they influenced the morphometric analyses and were not sufficient to protect the embryos during freezing and thawing because, 3h after thawing, none of the embryos survived. The CNTs penetrated the embryos and maintained a high percentage of intact embryos.
metadata.teses.dc.description: Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-graduação em Zootecnia, área de concentração em Produção Animal, para a obtenção do título de Doutor.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/3075
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções:DZO - Zootecnia - Doutorado (Teses)

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