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Título: Indução e identificação de poliploidia em Musa acuminata, Colla
Título Alternativo: Autotetraploidy induction and identification in banana (Musa spp.)
Autor(es): Pio, Leila Aparecida Salles
Orientador: Pasqual, Moacir
Membro da banca: Castro, Evaristo Mauro de
Silva, Sebastião Oliveira e
Davide, Lisete Chamma
Silva, Adriano Bortolotti
Área de concentração: Fitotecnia
Assunto: Duplicação de cromossomos
Bananicultura
Citometria de fluxo
Autotetraploidy
Banana
Identification
Data de Defesa: 21-Fev-2008
Data de publicação: 26-Ago-2014
Referência: PIO, L. A. S. Indução e identificação de poliploidia em Musa acuminata, Colla. 2008. 72 p. Tese (Doutorado em Agronomia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2008.
Resumo: O presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar a indução e a identificação de poliplóides por meio de análise estomática, da contagem de cromossomos e da citometria de fluxo, bem como o efeito da poliploidia e da mixoploidia nas características anatômicas e ultra-estruturais das cultivares de bananeira Malbut, Ouro, Lidi e Thong Dok Mak. Na indução de poliplóides, os explantes foram tratados com colchicina, nas concentrações de 0, 2,5; 7,5 e 12,5mM, por 24 e 48 horas e com oryzalina, nas concentrações de 0, 10, 30 e 50μM, por 4 e 7 dias. Para a identificação de poliplóides via análise estomática, amostras de folhas jovens de cada planta foram eletromicrografadas em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Foram avaliados o tamanho (diâmetro polar x diâmetro equatorial) e a densidade de estômatos. Para análise de citometria de fluxo, foi retirada uma pequena porção de tecido foliar de cada planta, triturada, para a liberação de núcleos e corada com iodeto de propídeo. Para cada amostra, 10 mil núcleos foram analisados. Para análise citogenética, ápices radiculares foram pré-tratados com solução de 8-HQ 500 mg L-1, por 3 horas e fixados em solução de Carnoy por 24 horas e submetidos a técnicas de esmagamento convencional. A coloração foi feita com solução de Giemsa a 10%. Para a realização da contagem do número de cloroplastídeos por células, do comprimento e da largura dos cloroplastídeos e área dos cloroplastídeos, foram feitas análises de características anatômicas e ultra-estruturais de plantas diplóides, mixoplóides e tetraplóides de três cultivares de bananeira: Lidi, Ouro e TDM. Fragmentos retirados de folhas jovens foram submetidos às técnicas de preparação tradicionais para análise em microscopia eletrônica de transmissão. Foram realizados os cortes em seções semifinas (>100nm) e ultrafinas (<100nm). Os cortes semifinos foram analisados em microscópio de luz. Foram avaliados comprimento e largura de células do parênquima paliçádico e lacunoso, epidermes adaxial e abaxial, espessura do limbo e número de cloroplastídeos. Os cortes ultrafinos foram examinados em microscópio eletrônico de transmissão e foram observadas características ultra-estruturais dos cloroplastos. O trabalho permitiu a identificação de 4 plantas e 6 mixoplóides pelas três técnicas de identificação utilizadas. As análises estruturais e ultra-estruturais permitem a separação dos diplóides, mas não apresentam diferenças entre tetraplóides e mixoplóides.
The aimed study to induct and to identify polyploidys identification through stomatal analysis, chromosome counting and flow cytometry, as well polyploidys and mixoploids effects on the structural and ultrastructural characteristics in banana varieties: Malbut, Ouro, Lidi e Thong Dok Mak. In polyploidys induction, explants were treated with concentrations of colchicine (0, 2.5; 7.5 and 12,5mM) for 24 and 48 hours and with oryzalin (0, 10, 30 and 50μM) for 4 and 7 days. Toward polyploidys identification through stomatal analysis, samples of young leaves from every plant were evaluated by scanning electron microscopy size (polar diameter x equatorial diameter) and stomatal density were evaluated. Toward analysis in flow cytometry, quantity of leave tissue from each plant was cuted and after, triturated (aiming a nucleus liberate) and redden with propidium iodide. A number of 10,000 events was evaluated. Toward cytogenetics analysis, types roots were previous treated with 8-HQ 500 mg L-1 solution for 3 hours and fixed in Carnoy solution for 24 hours and submitted to the conventional crushing techniques. Staining was done with solution of Giemsa (10%). Towards second experiment, analysis of structural and ultrastructural characteristics of diploids plants, mixoploids and tetraploids in 3 banana cultivars: Lidi, Ouro e TDM were carried out. Fragments from young leaves were submitted to the conventional techniques for analysis in transmition electron microscopy. Thick (>100nm) and thin (<100nm) sections were evaluated in light and transmition electron microscopy, respectively. Length and breadth of cells from palyçadic and spongy parenchyma, adaxial and abaxial epidermis, leave thickness were measured and chloroplasts numbers were estimated. While to thin sections ultrastructural characteristics of chloroplasts were examined. It was concluded that 4 plants were identified as tetraploids and 6 as mixoploids through three identification techniques. No differences between tetraploids and mixoploids was produced, only structural and ultrastructural characteristics of diploids.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/3250
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções: DAG - Agronomia/Fitotecnia - Doutorado (Teses)

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