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metadata.teses.dc.title: Padronização da técnica de imunocitoquímica no diagnóstico da leishmaniose visceral canina
metadata.teses.dc.title.alternative: Standardization of the immunocytochemistry technique in the diagnosis of canine visceral leishmaniasis
metadata.teses.dc.creator: Albuquerque, Adriana Silva
metadata.teses.dc.creator.Lattes: http://lattes.cnpq.br/3957220687651009
metadata.teses.dc.contributor.advisor1: Raymundo, Djeison Lutier
metadata.teses.dc.contributor.advisor-co1: Wouters, Angélica T. Barth
metadata.teses.dc.contributor.advisor-co2: Varaschin, Mary Suzan
metadata.teses.dc.contributor.referee1: Raymundo, Djeison Lutier
metadata.teses.dc.contributor.referee2: Wouters, Flademir
metadata.teses.dc.contributor.referee3: Sonne, Luciana
metadata.teses.dc.subject: Leishmaniose - Diagnóstico
Imunocitoquímica
Leishmaniose canina
Leishmaniasis - Diagnosis
Immunocytochemistry
Canine leishmaniasis
metadata.teses.dc.date.issued: 22-Mar-2019
metadata.teses.dc.description.sponsorship: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
metadata.teses.dc.identifier.citation: ALBUQUERQUE, A. S. Padronização da técnica de imunocitoquímica no diagnóstico da leishmaniose visceral canina. 2019. 57 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2019.
metadata.teses.dc.description.resumo: As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania, parasito que infecta e se multiplica em células do sistema monocítico fagocitário de diversas espécies animais. São doenças enquadradas como negligenciadas pela Organização Mundial de Saúde (OMS) e que afetam populações em diversos países. No Brasil já estão presentes em todas as regiões, causando prejuízos à saúde pública e onerações com tratamentos e prevenção. Antes associadas a áreas rurais, as leishmanioses hoje afetam também populações urbanas e os cães são considerados principais reservatórios da LV nesses ambientes. A transmissão do parasito se dá quando o inseto flebotomíneo ingere formas infectantes de leishmania ao realizar repasto sanguíneo em animais infectados, podendo transmitir esses parasitos em novo repasto. Para o diagnóstico da LV são utilizados o Teste Rápido Imunocromatográfico (TRI) para triagem e os testes sorológicos Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ou Ensaio Imunoenzimático (EIE) e a Reação de Imunofluorescência direta (RIFI), além da Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e o exame direto como confirmatórios. O exame direto, com a observação do parasito em amostras biológicas, é considerado teste padrão ouro, mas requer pessoal treinado para a identificação do protozoário na amostra. Métodos como a imunocitoquímica podem aumentar a acurácia dessa observação. O presente trabalho comparou 4 técnicas de preparação de amostras citológicas (cellblock, formol 10%, metanol e paraformaldeído/PBS) extraídas de medula óssea, pele e linfonodo, de 20 cães soropositivos para Leishmania sp., submetidas a protocolo de imunocitoquímica (ICQ). Com o protocolo de ICQ desenvolvido notou-se aumento de 15% de positivos em ICQ de medula óssea em relação ao exame citopatológico, de 30% na análise de linfonodos e de 5% para pele quando comparados aos exames citopatológicos, aumentando assim a eficiência do diagnóstico. As técnicas de fixação do material biológico apresentaram imunomarcação satisfatórias com melhores resultados obtidos pela técnica de cellblock de agarose seguida pela fixação em formol a 10% e emblocamento em parafina, fixação em álcool metanol e por último a técnica de fixação em paraformaldeído/PBS.
metadata.teses.dc.description.abstract: Leishmaniasis are diseases caused for protozoa of the genus Leishmania, a parasite that infects and multiplies in cells of the monocytic phagocytic system of several animal species. They are diseases framed as neglected by the World Health Organization (WHO) and affecting populations in several countries. In Brazil they are already present in all the regions, causing damages to the public health and wages with treatments and prevention. Previously associated with rural areas, leishmaniasis today also affect urban populations and dogs are considered the main LV reservoirs in these environments. The transmission of the parasite occurs when the phlebotomine insect ingests infectious forms of leishmania when performing blood ingestion in infected animals, being able to transmit these parasites in new ingestion. For the diagnosis of VL, the Rapid Immunochromatographic Test (TRI) for screening and the Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) or Immunoenzymatic Assay (EIE) and the Direct Immunofluorescence Reaction (IFR) tests, in addition to the Polymerase Chain Reaction (PCR) and direct examination as confirmatory. Direct examination, with the observation of the parasite in biological samples, is considered gold standard test, but requires personnel trained in the ide ntification of the protozoan in the sample. Methods such as immunocytochemistry may increase the accuracy of this observation. The present work compared 4 techniques for the preparation of cytological samples (cellblock, 10% formaldehyde, methanol and paraformaldehyde / PBS) extracted from bone marrow, skin and lymph node of 20 dogs seropositive to Leishmania sp., Submitted to an immunocytochemistry protocol (ICQ) . With the ICQ protocol, a 15% positive increase in bone marrow ICQ was observed in relation to cytopathological examination, 30% in lymph node analysis and 5% in skin when compared to cytopathological tests, thus increasing the efficiency of the diagnosis. The techniques of fixation of the biological material presented satisfactory immunostaining with better results obtained by the agarose cellblock technique followed by fixation in 10% formaldehyde and paraffin embedding, fixation in alcohol methanol and lastly the fixation technique in paraformaldehyde / PBS.
metadata.teses.dc.description: Arquivo retido, a pedido da autora, até março 2020.
metadata.teses.dc.identifier.uri: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/33250
metadata.teses.dc.publisher: Universidade Federal de Lavras
metadata.teses.dc.language: por
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