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metadata.teses.dc.title: Development of an analytical method for determining linoleic and stearic acid in sheep serum samples  
metadata.teses.dc.title.alternative: Desenvolvimento de um método analítico para determinação de ácido linoleico e esteárico em amostras de soro de ovelhas
metadata.teses.dc.creator: Bazana, Matheus Julien Ferreira
metadata.teses.dc.creator.Lattes: http://lattes.cnpq.br/7441434583520532
metadata.teses.dc.contributor.advisor1: Saczk, Adelir Aparecida
metadata.teses.dc.contributor.advisor-co1: Borges, Cleber Nogueira
metadata.teses.dc.contributor.referee1: Borges, Keyller Bastos
metadata.teses.dc.contributor.referee2: Lima, Lidiany Mendonça Zacaroni
metadata.teses.dc.subject: Ácidos graxos
LD-DLLME
Quimiometria
GC-FID
Gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID)
Low density based dispersive liquid-liquid microextraction (LD-DLLME)
Método de Folch
Fatty acids
Microextração líquido-líquido dispersiva de baixa densidade
Chemometrics
Folch method
metadata.teses.dc.date.issued: 16-Jun-2020
metadata.teses.dc.description.sponsorship: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
metadata.teses.dc.identifier.citation: BAZANA, M. J. F. Development of an analytical method for determining linoleic and stearic acid in sheep serum samples. 2020. 66 p. Dissertação (Mestrado em Agroquímica)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2020.
metadata.teses.dc.description.resumo: O preparo de amostra é uma etapa importante na extração dos analitos de matrizes complexas como as amostras biológicas. Os lipídios presentes nessas amostras podem ser encontrados associados a lipoproteínas, o que dificulta a determinação do perfil dos ácidos graxos nos organismos vivos. As técnicas tradicionais de análise como o método de Folch et al. (1957), apesar de ainda serem muito utilizadas, apresentam diversas desvantagens como a grande quantidade de solventes orgânicos utilizados, grande número de etapas, degradação dos compostos com insaturações e elevada toxicidade. Nesse sentido, as técnicas miniaturizadas são alternativas capazes de superar as inviabilidades dos métodos tradicionais. Dentre elas, tem-se a microextração líquido-líquido dispersiva de baixa densidade (LD-DLLME), que utiliza solvente de baixa densidade, menos tóxicos ao meio ambiente e em pequenas quantidades. Assim, o objetivo do trabalho foi desenvolver, validar e aplicar uma metodologia analítica para extração e determinação de ácido linoléico (AL) e esteárico (AE) em amostras de soro sanguíneo de ovinos. O método desenvolvido utilizou a LD-DLLME com etapa de esterificação e quantificação por cromatografia gasosa com detector por ionização em chama (GC/FID). A extração foi otimizada através do planejamento de misturas com o modelo polinomial de Scheffé. A inversa generalizada de Moore-Penrose foi aplicada ao modelo cúbico completo (MCC) de Scheffé, para determinar os três coeficientes dij concomitantemente possibilitando a interpretação química do modelo. A otimização avaliou as variáveis da LD-DLLME volume do meio de dispersão (solução salina de MgCl2 0,017%), volume do solvente extrator (tolueno) e volume do solvente de dispersor (metanol) e os resultados indicaram que a melhor condição de extração foi de 1400 μL do meio de dispersão, 400 μL de solvente extrator e 1200 μL de solvente dispersor. O método proposto foi validado para extração do ácido linoleico (AL) e para o ácido esteárico (AE) com bases nas diretrizes do guia EURACHEM/2014. A avaliação do efeito de matriz (EM) para o método desenvolvido foi classificado como alto e assim, todas as avaliações quantitativas foram realizadas pelo método de adição de padrão. O desempenho do método demonstrou seletividade, sensibilidade e precisão adequadas para ser aplicado em amostras reais, apresentando uma recuperação média de 98,54% e 103,83% para o AL e para o AE respectivamente. A LD-DLLME mostrou-se superior ao método de Folch et al. (1957), até então utilizado na determinação de ácidos graxos em amostras de soro sanguíneo de ovinos. Através da análise em amostras reais pode-se inferir que o método desenvolvido é eficiente no monitoramento dessas substâncias no organismo de ruminantes.
metadata.teses.dc.description.abstract: Sample preparation is an important step in the extraction of analytes from complex matrices such as biological samples. The lipids present in these samples can be found associated with lipoproteins, which makes it difficult to determine the profile of fatty acids in living organisms. Traditional analysis techniques such as the method of Folch et al. (1957), although they are still widely used, have several disadvantages such as the large amount of organic solvents used, large number of stages, degradation of compounds with unsaturation and high toxicity. In this sense, miniaturized techniques are alternatives capable of overcoming the impossibilities of traditional methods. Among them, there is the low density dispersive liquid- liquid microextraction (LD-DLLME), which uses low density solvent, less toxic to the environment and in small quantities. Thus, the objective of the work was to develop, validate and apply an analytical methodology for the extraction and determination of linoleic acid (AL) and stearic acid (AE) in sheep blood serum samples. The developed method used LD-DLLME with an esterification and quantification step by gas chromatography with flame ionization detector (GC/FID). The extraction was optimized through the planning of mixtures with the Scheffé polynomial model. The generalized inverse of Moore-Penrose was applied to Scheffé's complete cubic model (MCC), to determine the three dij coefficients concomitantly enabling the chemical interpretation of the model. The optimization evaluated the variables of the LD-DLLME dispersion medium volume (0.017% MgCl2 saline), extractor solvent volume (toluene) and dispersant solvent volume (methanol) and the results indicated that the best extraction condition was 1400 μL of the dispersion medium, 400 μL of extractor solvent and 1200 μL of dispersant solvent. The proposed method was validated for extraction of linoleic acid (AL) and for stearic acid (AE) based on the guidelines of the EURACHEM/2014 guide. The evaluation of the matrix effect (EM) for the developed method was classified as high and thus, all quantitative evaluations were performed using the standard addition method. The performance of the method demonstrated selectivity, sensitivity and precision adequate to be applied to real samples, showing an average recovery of 98.54% and 103.83% for the LA and LA respectively. LD-DLLME proved to be superior to the method of Folch et al. (1957), hitherto used in the determination of fatty acids in sheep blood serum samples. Through the analysis in real samples it can be inferred that the developed method is efficient in the monitoring of these substances in the body of ruminants.
metadata.teses.dc.identifier.uri: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/41474
metadata.teses.dc.publisher: Universidade Federal de Lavras
metadata.teses.dc.language: eng
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