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Title: Atividades biológicas dos óleos essenciais de três espécies do gênero Citrus e de seus componentes majoritários
???metadata.dc.creator???: Gomes, Marcos de Souza
???metadata.dc.contributor.advisor1???: Cardoso, Maria das Graças
???metadata.dc.contributor.referee1???: Nelson, David Lee
Batista, Luís Roberto
Soares, Marisi Gomes
Andrade, Milene Aparecida
???metadata.dc.description.concentration???: Agroquímica e agrobioquímica
Keywords: Antimicrobiano
Antiparasitário
Citotoxicidade
Hemolítico
Antioxidante
Antimicrobial
Antiparasitic
Cytotoxicity
Hemolytic
Antioxidant
???metadata.dc.date.submitted???: 24-Jul-2014
Issue Date: 22-Oct-2014
???metadata.dc.description.sponsorship???: Fundação de Amparo à Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Citation: GOMES, M. de S. Atividades biológicas dos óleos essenciais de três espécies do gênero Citrus e de seus componentes majoritários. 2014. 126 p. Tese (Doutorado em Agroquímica) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2014.
???metadata.dc.description.resumo???: This work was carried out in order to characterize and to quantify chemically the essential oils extracted from lemon taiti peel (Citrus aurantifolia), true lemon peel (Citrus limon), orange peel (Citrus sinensis). It was evaluated not only the antibacterial, antifungal and anti-trypanosome effects of the essential oils and their standards limonene, citral and the mixture (limonene + citral) but also the cytotoxic, hemolytic and antioxidant activities using several methodologies. The essential oils were extracted by hydrodistillation technique. Their chemical constituents were identified and quantified by GC-MS and GC-FID. To evaluate the effects on epimastigote forms of Trypanosoma cruzi the following concentrations of essential oils were tested 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.63, 7.81 mg mL-1. To analyze the antibacterial/antifungal activity, different concentrations were used 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.63, 7.81 mg mL-1. To assess the cytotoxic activity against Vero cells were tested concentrations 1000, 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.63, 7.81 mg mL-1 and to evaluate the hemolytic activity (hematocrit 0.15%) were employed the following concentrations 0.6, 1.0, 2.0, 4.0, 5.0 and 10.0 mL-1. In addition to the hemolytic test, scans were performed in the wavelength between 500 to 700 nm to assess whether there was hemoglobin oxidation. The antioxidant activity of three essential oil was also determined by several methods. The results of chemistry identification and quantification of the essential oils displayed three essential oils showed the limonene as a major component. It was found by anti-trypanosome activity that the effect of six treatments against the epimastigote form was weak, being the most effective the standards limonene and citral. Regarding antimicrobial activity the results were satisfactory for both bacteria and for fungi. The six treatments displayed high cytotoxic activity and dose-dependent effect. For hemolytic activity the standards (citral and limonene) and their mixture (limonene + citral) displayed higher effect at low concentrations, followed by three essential oils. It was also observed that all treatments showed oxidative effect on hemoglobin, being stronger for higher concentrations. Regarding the antioxidant activity it was verified by the TBARS methods and liposomes all essential oils had a pro-oxidant effect, in other words, they did not protect the lipid substrate from oxidation, they also oxidized them. As for the evaluation of the ability to capture the radicals, only the DPPH assay showed no antioxidant activity. However, for other methods yielded conflicting results. This demonstrated the importance to use multiple methods to evaluate the antioxidant activity, because different methods might provide different results. Regarding the oxidation of linoleic β-caroteno/ácido system method, it was found that the IC50 of the three essential oils were above 500 mg mL-1. For phosphomolybdenum method it was observed by analysis of variance that there was no significant difference between the essential oils analyzed. Thus, it can be observed that the three essential oils tested showed positive antioxidant activity in some methodologies only. This might be due to several factors inherent to each method that influence the antioxidant activity.
Este trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar e quantificar quimicamente os óleos essenciais extraídos das cascas do limão-taiti (Citrus aurantifolia), limão-verdadeiro (Citrus limon) e laranja (Citrus sinensis), bem como avaliar, juntamente com os padrões limoneno, citral e sua mistura (limoneno + citral), seus efeitos antibacteriano, antifúngico, antitripanossoma, citotóxico e hemolítico e avaliar também as atividades antioxidantes somente dos referidos óleos essenciais em diversas metodologias. Os óleos essenciais foram extraídos pela técnica de hidrodestilação e a identificação e quantificação dos constituintes químicos, pelas análises em CG-EM e CG-DIC. Para avaliar o efeito sobre a forma epimastigota do Trypanosoma cruzi as concentrações testadas foram (500; 250; 125; 62,5; 31,25; 15,63; 7,81 µg mL-1) e, para avaliar a atividade antibacteriana e antifúngica, as concentrações foram (500; 250; 125; 62,5; 31,25; 15,63; 7,81 e 3,91 μL mL-1). Para avaliar a atividade citotóxica contra às células Vero as concentrações testadas foram (1000; 500; 250; 125; 62,5; 31,25; 15,63; 7,81 µg mL-1) e, para avaliar a atividade hemolítica (hematócrito 0,15%), empregaram-se as seguintes concentrações (0,6; 1,0; 2,0; 4,0; 5,0 e 10,0 µL mL-1). Adicionalmente ao teste hemolítico, foram realizadas varreduras nos comprimentos de onda de 500 a 700nm para avaliar se houve oxidação da hemoglobina. Também foi determinada a atividade antioxidante dos três óleos essenciais por meio de diversas metodologias. Verificou-se por meio da atividade antitripanossoma que o efeito dos seis tratamentos contra à forma epimastigota foi fraco, sendo os padrões limoneno e citral os mais eficazes. Em relação à atividade antimicrobiana, os resultados foram satisfatórios, tanto para os fungos quanto para as bactérias. Observou-se, por meio da atividade citotóxica, que os seis tratamentos apresentaram efeitos elevados, verificando em todos eles um efeito dose-dependente. Para a atividade hemolítica, os padrões (citral e limoneno) e sua mistura (citral + limoneno) possuíram maior efeito em baixas concentrações, seguido dos três óleos essenciais. Percebeu-se também que todos os tratamentos apresentaram efeito oxidante na hemoglobina, sendo mais intenso para as concentrações mais elevadas. Com relação às atividades antioxidantes, verificou-se, pelos métodos TBARs e Lipossomas, que todos os óleos essenciais tiveram um efeito pró-oxidante, ou seja, além de não protegerem o substrato lipídico da oxidação, eles também oxidaram. Já para a avaliação da capacidade de captura dos radicais, somente o método de DPPH não apresentou atividade antioxidante, no entanto, para os outros métodos, obtiveram-se resultados antagônicos. Isso demonstra a importância da utilização de vários métodos de avaliação da atividade antioxidante, pois métodos diferentes fornecem resultados diferentes. Com relação ao método da oxidação do sistema β-caroteno/ácido linoleico, verificou-se que o IC50 dos três óleos essenciais foram acima de 500 µg mL-1. E para o método fosfomolibdênio, observou-se, por meio da análise de variância, que não houve diferença significativa entre os óleos essenciais analisados. Com isso, pode-se observar que os três óleos essenciais testados apresentaram atividade antioxidante positiva em algumas metodologias utilizadas e, em outras, não. Isso pode ser devido a diversos fatores inerentes a cada metodologia que influenciam na atividade antioxidante.
Description: Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Agroquímica, área de concentração em Agroquímica e Agrobioquímica, para a obtenção do título de Doutor.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/4464
Publisher: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
???metadata.dc.language???: pt_BR
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