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Título: Biologia reprodutiva, filogenia e patogenicidade de Fusarium decemcellulare
Autor(es): Guimarães, Elaine Aparecida
Orientador: Pfenning, Ludwig Heinrich
Membro da banca: Schwan, Rosane Freitas
Alves, Eduardo
Mathioni, Sandra Marisa
Área de concentração: Microbiologia Agrícola
Assunto: Albonectria
Theobroma cacao
Mating type
Galha-floral
Superbrotamento
Filogenia molecular
Cushion galls
Molecular phylogeny
Data de Defesa: 22-Fev-2013
Data de publicação: 5-Nov-2013
Agência de Fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Referência: GUIMARÃES, E. A. Biologia reprodutiva, filogenia e patogenicidade de Fusarium decemcellulare. 2013. 68 p. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Agrícola)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2013.
Resumo: Fusarium decemcellulare é uma espécie fúngica encontrada comumente em regiões tropicais e subtropicais, conhecida como sapróbio e também parasita de diversas plantas lenhosas, induzindo a formação de galhas, superbrotamento e cancros. O objetivo com esse trabalho foi caracterizar isolados de F. decemcellulare obtidos de diferentes hospedeiros e substratos, por avaliação de marcadores morfológicos, cruzamentos em laboratório visando à indução da fase sexuada, análise filogenética e teste de patogenicidade. Culturas monospóricas foram submetidas ao teste de homotalismo para verificar a formação espontânea de peritécios férteis. Dos isolados heterotálicos, o mating type foi determinado por PCR utilizando primers específicos e isolados de tipos opostos foram então cruzados em meio cenoura-agar. A análise filogenética foi realizada com sequências parciais dos genes tef-1α, rpb2, acl1 e da região ITS-28S rDNA, incluindo sequências de isolados de referência e de outras espécies. Isolados selecionados de F. decemcellulare foram inoculados em sementes de cacaueiro para condução de testes de patogenicidade em casa-de-vegetação. Todos os 67 isolados avaliados apresentaram marcadores morfológicos característicos da espécie F. decemcellulare, de acordo com a literatura. Entre os isolados avaliados, nove foram homotálicos. Entre os heterotálicos, 21 pertencem ao MAT-1 e 33 ao MAT-2. Foram realizados aproximadamente 1590 cruzamentos e em 54 cruzamentos foi constatada a formação de peritécios férteis, exsudando ascósporos. Foi observada a presença de quatro ascósporos por asco em isolados homotálicos e oito ascósporos por asco em isolados heterotálicos. Na análise filogenética, todas as árvores individuais apresentaram topologia similar, agrupando os isolados heterotálicos, obtidos de cacaueiro, mangueira e guaranazeiro em um clado distinto. Grupos distintos foram formados por isolados homotálicos, isolados de outros substratos ou hospedeiros e isolados de referência de F. decemcellulare. No teste de patogenicidade, somente os isolados heterotálicos induziram sintomas de galhas. Os resultados evidenciam que isolados associados à galhas e superbrotamento nos hospedeiros avaliados pertencem a uma espécie filogenética e biológica distinta, diferente de F. decemcellulare. Os resultados confirmam ainda o número dos ascósporos como marcador na separação das formas homotálicas e heterotálicas.
Fusarium decemcellulare is a fungal species commonly found in tropical and subtropical regions, known as saprobe and also parasite tot many woody plants, inducing the formation of galls, oversprouting and cancers. The objective of this work was to characterize F. decemcellulare isolates obtained from different hosts and substrates, by evaluating morphological markers, laboratory crossings aiming at inducing the sexual phase, phylogenetic analysis and pathogenicity test. Single spore cultures were submitted to homothallism test in order to verify the spontaneous formation of fertile perithecia. Of the heterothallic isolates, the mating type was determined by PCR using specific primers and opposite type isolates were then crossed in carrot-agar medium. The phylogenetic analysis was performed with partial sequences of the genes tef-1α, rpb2, acl1 and of the ITS-28S rDNA region, including sequences of reference isolates and of other species. Selected F. decemcellulare isolates were inoculated into cocoa plant seeds for the conduction of pathogenicity tests in greenhouse. All 67 evaluated isolates presented morphological markers typical of F. decemcellulare, according to literature. Among the evaluated isolates, nine were homothallic. Among the heterothallic, 21 belonged to the MAT-1 and 33 to the MAT-2.Approximately 1590 crossings were performed and, in 54 crossings we observed the formation of fertile perithecia, exuding ascospores. The presence of four ascospores per asci in homothallic isolates and eight ascospores per asci in heterothallic isolates was observed. In the phylogenetic analysis, all individual trees presented similar topology, grouping the heterothallic isolates obtained from cocoa plant, mango tree and guarana plant in a distinct clad. Distinct groups were formed by homothallic isolates, isolates from other substrates or hosts and F. decemcellulare reference isolates. In the pathogenicity test, only the heterothallic isolates induced gall symptoms. The results showed that isolates associated with galls and oversprouting on the evaluated hosts belong to a distinct phylogenetic and biological species, different from F. decemcellulare. The results confirm the number of ascospores as marker in separating the homothallic and heterothallic forms.
Informações adicionais: Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Microbiologia Agrícola, área de concentração em Microbiologia Agrícola, para a obtenção do título de Mestre.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/1286
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções: DBI - Microbiologia Agrícola - Mestrado (Dissertações)

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