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dc.creatorFernandes, Maysa Lima Parente-
dc.date.accessioned2019-10-25T13:08:03Z-
dc.date.available2019-10-25T13:08:03Z-
dc.date.issued2019-10-24-
dc.date.submitted2019-08-22-
dc.identifier.citationFERNANDES, M. L. P. Agroindustrial low-cost sources as substrate for production of l-asparaginase by filamentous fungi. 2019. 68 p. Tese (Doutorado em Microbiologia Agrícola)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2019.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/37349-
dc.description.abstractL-asparaginase (EC 3.5.1.1) is an enzyme produced by various microorganisms and responsible for the conversion of the amino acid L-asparagine to L-aspartic acid and ammonium. Its applications are wide ranging from the food industry providing the reduction of acrylamide in foods subjected to high temperatures as well as in the pharmaceutical field being applied as antitumor agent.Thus, the present work aimed to prospect for L-asparaginase from actinobacteria isolated from the Brazilian Cerrado (Minas Gerais), yeasts belonging to the Agricultural Microbiology Cultures Collection (CCMA) and filamentous fungi isolated from composting. All microorganisms were evaluated in semi-quantitative tests using L-asparagine-modified Czapeck Dox culture medium to select potential enzyme producers, followed by submerged fermentation and quantification of enzymatic activity by the Nessler method.The selected microorganisms were evaluated under the influence of different carbon sources as inducers on L-asparaginase production. Some actinobacterial and yeast species were positive for L-asparaginase production in the semi-quantitative assay, however none of these microorganisms produced the enzyme in FSbm. The seven filamentous fungi evaluated raised the pH of the medium in the semi-quantitative assay that indicates enzyme production.The filamentous fungus Penicillium solitum presented the highest enzymatic index in the semi-quantitative assay with 3.14 ± 0.24 (IE). An initial quantitative assay was performed with Aspergillus caepitosus, Aspergillus oryzae and Penicillium solitum strains in which the effect of carbon source (glucose and sucrose), pH (6.0; 6.5; 7.0) and fermentation time (24h, 48h, 72h, 96h and 120h) were evaluated. All results were subjected to analysis of variance (ANOVA) according to the data. It was found that the best treatments were 28, with volumetric activity (0.0320 U / mL) for Penicillium solitum, 23 with (0.0686 U / mL) for Aspergillus caepitosus and 7 with (0.0388 U / ml) for Aspergillus oryzae. Aspergillus caepitosus and Aspergillus oryzae strains were selected to produce L-asparaginase using Pereskiaaculeata Miller fibrous residue as substrate in FES and FSbm and whey in FSbm.In FES three humidifying agents were investigated, tap water, deionized water and Khanna salts. The values for enzyme production by Aspergillus caepitosus and Aspergillus oryzae in FES were (0.0245 U / mL) with Khana salts and (0.0185 U / mL) with deionized water, respectively. In FSbm for Aspergillus caepitosus extracellular L-asparaginase whey was the best carbon source with (0.0249 U/ mL). The production of intracellular L-asparaginase for the two filamentous fungi evaluated showed that both substrates in submerged fermentation were efficient for enzyme production. The possibility of using Pereskiaaculeata Miller extract as a low-cost substrate for L-asparaginase production is an innovative alternative. Such results are unpublished and have not been reported in the literature.pt_BR
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)pt_BR
dc.languageengpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Lavraspt_BR
dc.rightsrestrictAccesspt_BR
dc.subjectEnzimaspt_BR
dc.subjectMicrorganismospt_BR
dc.subjectProspecçãopt_BR
dc.subjectEnzymespt_BR
dc.subjectMicroorganismspt_BR
dc.subjectProspectionpt_BR
dc.titleAgroindustrial low-cost sources as substrate for production of L-asparaginase by filamentous fungipt_BR
dc.title.alternativeFontes agro-industriais de baixo custo como substrato para produção de L-asparaginase por fungos filamentosospt_BR
dc.typetesept_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Microbiologia Agrícolapt_BR
dc.publisher.initialsUFLApt_BR
dc.publisher.countrybrasilpt_BR
dc.contributor.advisor1Dias, Disney Ribeiro-
dc.contributor.advisor-co1Schwan, Rosane Freitas-
dc.contributor.advisor-co2Souza, Angélica Cristina de-
dc.contributor.referee1Bastos, Sabrina Carvalho-
dc.contributor.referee2Veríssimo, Lizzy Ayra Alcântara-
dc.contributor.referee3Schwan, Rosane Freitas-
dc.contributor.referee4Guedes, Karina Teixeira Magalhães-
dc.description.resumoA L-asparaginase (EC 3.5.1.1) é uma enzima produzida por diversos microrganismose responsável pela conversão do aminoácido L-asparagina em ácido L-aspártico e amônio. As suas aplicações são abrangentes, desde a indústria alimentícia proporcionando a redução de acrilamida em alimentos submetidos a altas temperaturas, assim como na área farmacêutica sendo aplicada como agente antitumoral.Assim, o presente trabalho teve por objetivo a prospecção de L-asparaginase a partir de actinobactérias isoladas do Cerrado brasileiro (Minas Gerais), leveduras pertencentes a Coleção de Culturas da Microbiologia Agrícola (CCMA) e fungos filamentosos isolados de compostagem. Todos os microrganismos foramavaliados nos testes semi-quantitativos utilizando o meio de cultivo CzapeckDox modificado com L-asparagina para selecionar os potenciais produtores da enzima, em seguida foi realizada fermentação submersa e quantificação da atividade enzimática pelo método de Nessler. Os microrganismos selecionados foram avaliados quanto a influência de diferentes fontes de carbono como indutores na produção de L-asparaginase. Algumas espécies de actinobactérias e leveduras foram positivas para a produção de L-asparaginase no ensaio semi-quantitativo, entretanto nenhum desses microrganismos produziu a enzima em FSbm. Os sete fungos filamentosos avaliados conseguiram elevar o pH do meio, no ensaio semi-quantitativo que indica a produção da enzima. O fungo filamentoso Penicillium solitumapresentou o maior índice enzimático no ensaio semi-quantitativocom 3.14 ± 0.24 (IE). Foi realizado um ensaio quantitativo inicial, com as linhagens de Aspergillus caepitosus, Aspergillus oryzae e Penicillium solitum no qual o efeito da fonte de carbono (glicose e sacarose), pH (6,0; 6.5; 7,0) e tempo de fermentação (24h, 48h, 72h, 96h e 120h) foram avaliados. Todos os resultados foram submetidos à Análise de Variância (ANOVA) de acordo com os dados foi verificado que os melhores tratamentos foram 28, com atividade volumétrica de (0.0320 U/mL) para Penicillium solitum, 23 com (0.0686 U/mL) para Aspergillus caepitosuse 7 com (0.0388 U/mL) para Aspergillus oryzae. As linhagens de Aspergillus caepitosus e Aspergillus oryzae foram selecionadas para produzir L-asparaginase utilizando o resíduo fibroso de Pereskiaaculeata Miller como substrato em FES e FSbm e soro de leite em FSbm. Em FES três agentes umidificantes foram investigados, água de torneira, água deionizada e sais de Khanna. Os valores para produção da enzima por Aspergillus caepitosus e Aspergillus oryzae em FES foram de (0,0245 U/mL) com sais de Khana e (0,0185 U/mL), com água deionizada, respectivamente. Em FSbm para a L-asparaginase extracelular deAspergillus caepitosuso soro de leite foi a melhor fonte de carbono com (0,0249 U/mL).A produção de L-asparaginase intracelular para os dois fungos filamentosos avaliados foi possível observar que os dois substratos na fermentação submersa foram eficientes para a produção da enzima.A possibilidade de utilização do extrato de PereskiaaculeataMiller como substrato de baixo custo para a produção de L-asparaginase é uma alternativa inovadora. Tais resultados são inéditos e ainda não foram relatados na literatura.pt_BR
dc.publisher.departmentDepartamento de Biologiapt_BR
dc.subject.cnpqMicrobiologia Agrícolapt_BR
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/7435495414222284pt_BR
Appears in Collections:Microbiologia Agrícola - Doutorado (Teses)



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