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dc.creatorRocha, Josilene Félix da-
dc.date.accessioned2023-10-17T13:59:26Z-
dc.date.available2023-10-17T13:59:26Z-
dc.date.issued2023-10-17-
dc.date.submitted2018-08-17-
dc.identifier.citationROCHA, J. F. da. Pré-validação de promotor tecido-específico de raiz e genes de resistência a fusariose em Nicotiana tabacum. 2018. 81 p. Tese (Doutorado em Biotecnologia Vegetal)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2018.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/58423-
dc.description.abstractThe production of genetically modified plants with specific characteristics is a highly promising process for plant genetic breeding that have been severely threatened by diseases such as fusarium wilt, for example, which causes great economic losses. In addition to the data mining of numerous candidate genes that could be used for teste disease resistance, the lack of tissue-specific promoters that allow these genes to be expressed only in target tissues, increase the population's distrust of plant genetically modified. Research on the use of tissue-specific promoters is important, since they drive the genes expression only in the organ/tissue of interest, avoiding expression in all parts of the plant, which in addition to having a high energy cost, can cause undesirable phenotypic effects. The main of this work was to evaluate in vitro the effectiveness of a root tissue-specific promoter and the functionality of two resistance candidate genes (Foc1 and Foc2) against fusarium wilt through genetic transformation of a model plant (Nicotiana tabacum) using Agrobacterium tumefaciens. In the results of the expression analysis of GUS reporter gene under the regulation of the tissue-specific promoter (Prom_Musa_Embrapa_005) in a core version (pCore) it was possible to confirm their specificity to the root, once the histochemical assay to detect the enzymatic activity of β-glucuronidase (GUS) made in leaf and root tissues of transformed N. tabacum, showed activity only in root, especially in the root cap, demonstrating the potential to provide a focused expression. In the gene expression analysis by qPCR it was also possible to verify the specific expression of the GUS gene in the roots of transformed plants with the promoter and the constitutive expression of the positive control as well as with the candidate resistance gene (Foc1). The constitutive expression of Foc1 occurred as expected because the gene was under CaMV-35S promoter regulation. From this analysis it is possible to confirm that the plants were effectively transformed with the resistance gene. Foc1 presents potential to be introduced into cultivars of interest, making possible the development of fusarium wilt resistant varieties. This study will support the preparation of new constructs with tissue-specific promoters regulating Foc1 gene expression.pt_BR
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)pt_BR
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Lavraspt_BR
dc.rightsacesso abertopt_BR
dc.subjectAgrobacterium tumefascienspt_BR
dc.subjectFusariosept_BR
dc.subjectMusa spp.pt_BR
dc.subjectTabacopt_BR
dc.subjectTransformação genéticapt_BR
dc.subjectFusarium wiltpt_BR
dc.subjectTobacopt_BR
dc.subjectGenetic transformationpt_BR
dc.titlePré-validação de promotor tecido-específico de raiz e genes de resistência a fusariose em Nicotiana tabacumpt_BR
dc.typetesept_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia Vegetalpt_BR
dc.publisher.initialsUFLApt_BR
dc.publisher.countrybrasilpt_BR
dc.contributor.advisor1Diniz, Leandro Eugenio Cardamone-
dc.contributor.referee1Lédo, Ana da Silva-
dc.contributor.referee2Muniz, Ana Veruska Cruz da Silva-
dc.contributor.referee3Machado, Caroline de Araujo-
dc.contributor.referee4Almeida, Daniela Droppa-
dc.description.resumoA produção de plantas geneticamente modificadas com características específicas é um processo altamente promissor para o melhoramento genético de plantas que têm sido severamente ameaçadas por doenças como a fusariose, por exemplo, que causa grandes perdas econômicas. Além da mineração de inúmeros genes candidatos que poderão ser usados para testes de resistência a estas doenças, a falta de promotores tecido-especifico que permitam que estes genes sejam expressos apenas nos tecidos alvo aumentam ainda mais a desconfiança da população a cerca do uso de plantas geneticamente modificadas. Pesquisas sobre o uso de promotores tecido-específicos são importantes, uma vez que esses direcionam a expressão de genes apenas nos órgãos/tecidos de interesse, evitando a expressão em todas as partes da planta, que além de ter elevado custo energético, pode causar efeitos fenotípicos indesejáveis. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar in vitro a efetividade de um promotor tecido-específico para raiz e a funcionalidade de dois genes candidatos (Foc1 e Foc2) de resistência a fusariose mediante transformação genética de uma planta modelo (Nicotiana tabacum) utilizando Agrobacterium tumefaciens. Nos resultados da análise da expressão do gene repórter GUS sob a regulação do promotor tecido-específico (Prom_Musa_Embrapa_005) na versão parcial (pCore) foi possível confirmar sua direcionalidade para raiz, pois no ensaio histoquímico para detecção da atividade enzimática β-glucuronidase (GUS) realizado em folha e raíz de N. tabacum transformado não houve detecção de atividade GUS na folha, tendo apresentado atividade apenas na raiz, especialmente, na coifa, demonstrando potencial para fornecer uma expressão focalizada. Na análise da expressão gênica por qPCR também foi possível verificar a expressão específica do gene GUS na raiz das plantas transformadas com o promotor e a expressão constitutiva do controle positivo assim como do gene de resistência candidato (Foc1). A expressão constitutiva de Foc1 ocorreu como esperado, pois o gene estava sob regulação do promotor CaMV-35S. A partir desta análise é possível confirmar que as plantas foram efetivamente transformadas com o gene de resistência. Foc1 apresenta potencial para ser introduzido em cultivares de interesse, auxiliando no desenvolvimento de variedades resistentes a fusariose. Este estudo subsidiará o preparo de novas construções com promotores tecido-específicos regulando a expressão do gene Foc1.pt_BR
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Naturaispt_BR
dc.subject.cnpqMelhoramento Vegetalpt_BR
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9688699129502400pt_BR
Aparece nas coleções:Biotecnologia Vegetal - Doutorado (Teses)



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