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metadata.teses.dc.title: Estudo biológico e molecular de dois isolados de Lettuce mosaic virus (LMV)
metadata.teses.dc.title.alternative: Biological and molecular study of two isolates of lettuce mosaic virus (LMV)
metadata.teses.dc.creator: Pereira, Kelly Marques
metadata.teses.dc.creator.Lattes: http://lattes.cnpq.br/8568725729534562
metadata.teses.dc.contributor.advisor1: Figueira, Antonia dos Reis
metadata.teses.dc.contributor.advisor-co1: Duarte, Priscilla de Sousa Geraldino
metadata.teses.dc.contributor.referee1: Souza, Sára Maria Clalfoun de
metadata.teses.dc.contributor.referee2: Pinto, César Augusto Brasil
metadata.teses.dc.subject: Lettuce mosaic virus
Alface - Vírus
Alface - Cultivo
Lettuce - Virus
Lettuce - Cultivation
metadata.teses.dc.date.issued: 2-Feb-2017
metadata.teses.dc.description.sponsorship: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
metadata.teses.dc.identifier.citation: PEREIRA, K. M. Estudo biológico e molecular de dois isolados de Lettuce mosaic virus (LMV). 2018. 50 p. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia Vegetal)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2017.
metadata.teses.dc.description.resumo: O Lettuce mosaic virus (LMV) é considerado um dos vírus de maior importância na cultura da alface, pois além de causar perdas consideráveis na cultura, é transmitido por sementes e por afídeos. Em condições naturais, podem ocorrer diversos variantes genéticos do LMV, como a estirpe que causa o fechamento de cabeça em alface cv. Regina 579, que tem sido estudada no DFP/UFLA, denominado LMV cf. Neste trabalho, foi estudado o efeito dessa estirpe, em comparação com outra estirpe, denominado LMV AF198, em 12 cultivares de alface: Quatro Estações, Grand Rapids, Rubete, Everglades, Salinas 88, Winslow, Colorado, Regina, Raider Plus, Balsamo, Luiza e Grandes Lagos, As cultivares de alface foram inoculadas mecanicamente com os dois isolados virais, foram mantidas repetições como controle. As plantas foram monitoras visualmente, para avaliação dos sintomas e, a partir do 14° dia após inoculação, foram testadas, semanalmente, pelo teste sorológico DAS-ELISA para acompanhar o desenvolvimento da infecção. As cultivares que não foram positivas para o DAS-ELISA e as que apresentaram sintomas diferentes entre as estirpes foram submetidas à extração de RNA e ao RT-PCR. Simultaneamente, foram desenhados primers específicos para amplificação das proteínas P3 e 6K2, uma vez que em trabalhos anteriores, sugeriu-se um estudo dessas proteínas, ou seja, as mesmas candidatas à indução do sintoma atípico do LMV cf. Dentre os sintomas observados, as cultivares em que se apresentaram o fechamento da cabeça quando inoculadas com LMV Cf, foram, Regina 579 e Quatro Estações. Na estirpe LMV cf, as cvs. Rubete, Everglades, Salinas 88 e Luíza apresentaram resistência, com resultado negativo no DAS-ELISA, as demais cvs. apresentaram concentração de partículas virais e foram positivas. Na estirpe LMV AF198, somente as cvs. Everglades e Luíza mantiveram a resistência, apresentando resultado negativo; dentre as cvs. que apresentaram resultado positivo destaca-se a Salinas 88, que, embora não tenha apresentado sintomas, foi detectada concentração de partículas virais com resultado positivo no DAS-ELISA, mesmo resistente. No RT-PCR todas as cvs. analisadas foram positivas. Foi concluído que existe diferença entre as duas estirpes, as quais podem ser observadas nos sintomas induzidos nas cvs. e nos resultados obtidos pelo DAS-ELISA e RT-PCR. As proteínas 6K2 dos dois isolados foram expressas em plantas transgênicas, não tendo havido diferenças entre elas, sugere-se o estudo das demais proteínas. Esse estudo traz informações importantes na relação desse patógeno com a planta hospedeira e os resultados obtidos colaboram com os estudos de melhoramento de cultivares de alface resistente às diversas estirpes do LMV.
metadata.teses.dc.description.abstract: Lettuce mosaic virus (LMV), transmitted by seeds and aphids, is considered one of the most important viruses in lettuce crop, given that it causes considerable losses in the crop. Several genetic variants of LMV can occur under natural conditions, such as the strain that causes head closure in cv. Regina 579, which has been studied at the Department of Phytopathology (DFP) of the Universiadade Federal de Lavras (UFLA), denominated LMV cf. In this work, the effect of this strain over 12 lettuce cultivars was compared to that of another strain, LMV AF198, using the following cultivars: Quatro Estações, Grand Rapids, Rubete, Everglades, Salinas 88, Winslow, Colorado, Regina, Raider Plus, Balsamo, Luiza and Great Lakes. The lettuce cultivars were mechanically inoculated with the two viral isolates, maintaining a few replicates as control. The plants were visually monitored for symptom assessment and, from the 14 th day after inoculation, were weekly tested using the DAS-ELISA serological test to monitor infection development. The cultures with negative DAS-ELISA results, and those presenting different symptoms between the strains, were submitted to RNA extraction and RT-PCR. Simultaneously, specific primers were designed to amplify the P3 and 6K2 proteins. In previous studies, it has been suggested that these proteins be studied, as they are candidates for the induction of the atypical LMV cf. symptom. Among the symptoms observed, the cultivars presenting head closure when inoculated with MRL cf. were Regina 579 and Quatro Estações. In the LMV cf. strain, cvs. Rubete, Everglades, Salinas 88 and Luíza presented resistance, with negative DAS-ELISA results. The remaining cvs. Presented viral particles concentration, and were positive. In strain LMV AF198, only cvs. Everglades and Luíza maintained resistance, presenting negative result. Among the cvs. that showed positive results, Salinas 88 was highlighted given that, despite the lack of symptoms, presented viral particles concentration, with a positive DAS-ELISA result, even while resistant. When using RT-PCR, all cvs. analyzed were positive. In conclusion, there was difference between the two strains, which can be observed in the symptoms induced in cvs. and with the results obtained by DAS-ELISA and RT-PCR. The 6K2 proteins of both isolates were expressed in transgenic plants, with no differences between them, suggesting the study of the other proteins. This study provides important information on the relation between this pathogen and the host plant, and the results obtained contribute to the breeding studies of lettuce cultivars resistant to various LMV strains.
metadata.teses.dc.identifier.uri: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/28537
metadata.teses.dc.publisher: Universidade Federal de Lavras
metadata.teses.dc.language: por
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