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Título: Obtenção de híbridos hexaplóides e análise genômica de Pennisetum sp por citometria de fluxo
Título(s) alternativo(s): Obtaining hexaploids hybrids and genomic analysis of Peniisetum sp. by flow cytometry
Autor : Campos, José Marcello Salabert de
Primeiro orientador: Davide, Lisete Chamma
Primeiro membro da banca: Viccini, Lyderson Facio
Torres, Giovana Augusta
Pereira, Antonio Vander
Barbosa, Sandro
Área de concentração: Genética e Melhoramento de Plantas
Palavras-chave: Pennisetum purpureum
Pennisetum glaucum
Duplicação cromossômica
Colchicina
Citometria de fluxo
Chromosome duplication
Colchicine
Flow cytometry
Data da publicação: 22-Set-2014
Referência: CAMPOS, J. M. S. de. Obtenção de híbridos hexaplóides e análise genômica de Pennisetum sp. por citometria de fluxo. 2007. 115 p. Tese (Doutorado em Genética e Melhoramento de Plantas)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2007.
Resumo: No melhoramento de Pennisetum, a hibridação interespecífica entre o capim elefante (Pennisetum purpureum) e o milheto (Pennisetum galucum) é uma das alternativas para a obtenção de cultivares superiores. Este híbrido (triplóide) apresenta uma grande limitação para o seu uso nos programas de melhoramento, a infertilidade que leva a necessidade de sua propagação vegetativa. A fertilidade pode ser restaurada através da duplicação cromossômica. Essa estratégia torna possível o ingresso dos híbridos hexaplóides nos programas de melhoramento de Pennisetum, reunindo características desejáveis nos híbridos e permitindo a sua propagação via sementes. Esta manipulação de ploidia necessita de metodologia para análise em larga-escala das plantas. A citometria de fluxo representa esta tecnologia. A citometria de fluxo é uma técnica que permite a obtenção de medidas físicas e químicas de partículas (células, núcleos, cromossomos e organelas). No melhoramento de plantas, a citometria apresenta um grande número de aplicações. Comparada a análise de ploidia por contagem de cromossomos, a citometria de fluxo oferece um método alternativo, rápido, simples e acurado. Por essas razões, ela tem se tornado um método popular para análise de ploidia, detecção de mixoplóides e aneuplóides, análise de ciclo celular e de polisomatia, análise de grãos de pólen e estimativas do conteúdo de DNA absoluto ou tamanho de genoma. Neste trabalho, a citometria de fluxo foi utilizada para estimar o conteúdo de DNA e ploidia em plantas da população Capileto, com o objetivo de seleção de plantas hexaplóides. Adicionalmente, a técnica foi utilizada para avaliação de ploidia em um experimento de duplicação cromossômica. Nesta análise, 8,5% das plantas foram identificadas como hexaplóides. A confirmação posterior da condição hexaplóide foi realizada por meio de características estomáticas e contagem de cromossomos. Mudanças genômicas associadas com a hibridação interespecífica e alopoliploidização foram observadas. Os dados obtidos sugerem a eliminação de sequências e cromossomos durante a alopoliploidização, que pode representar uma resposta adaptativa programada ao estresse genômico causado pela hibridação e alopoliploidização.
In Pennisetum breeding, the interespecific hybridization between napiergrass (Pennisetum purpureum) and pearl millet (Pennisetum glaucum) are an alternative to obtain superior cultivars. This hybrid (triploid) present a greatest limitation for it use in breeding programs, the infertility leading to a vegetative propagation. Ferility can be restored through chromosomal duplication. This made possible the retorn of hexaploid hybrids to Pennisetum genetic breeding programs, redeeming desired characteristics in hybrids and allowing its propagation through seeds. This ploidy manipulation need of technique for high-throughput analysis of the plants. Flow cytometry represent this technology. Flow cytometry refers to the measurement of physical and chemical characteristics of particles (cells, nuclei, chromosomes and organelles). In plant breeding, the flow cytometry present a wide range of application. Compared to ploidy measurement by conventional chromosome couting, flow cytometry offers a valuable, rapid, simple, accurate and fairly cheap alternative. For this reason, it has become a popular method for ploidy screening, detection of mixoploidy and aneuploidy, cell cycle analysis, assesment of degree of polysomaty, pollens grains analysis and estimation of absolute DNA content or genome size. In this work, flow cytometry was used for DNA content and ploidy estimation in plants of the Capileto population, with the objetive of hexaploid plant selection. Additionally, the technique was used for ploidy evaluation in chromosome doubling experiment. In this analysis, 8.5% of the plants were determined to be hexaploid. Further confirmation of the hexaploid condition was performed with stomatal morphology and chromosome count. Genomic changes were observed associated with interespecific hybridization and allopolyploidization. The data obtained suggested sequences and chromosome elimnation during allopolyploidization, that may represent a programmed adaptative response to genomic stress caused by hybridization and allopolyploid.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/3856
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções:DBI - Genética e Melhoramento de Plantas - Doutorado (Teses)

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