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Título: Obtenção de protoplastos de híbridos triplóides entre o capim-elefante e milheto
Título(s) alternativo(s): Protoplasts production from Napier grass and pearl millet triploid hybrids
Autor : Timbó, Ana Luiza de Oliveira
Primeiro orientador: Davide, Lisete Chamma
Primeiro membro da banca: Pinto, José Eduardo Brasil Pereira
Pereira, Antonio Vander
Área de concentração: Genética e Melhoramento de Plantas
Palavras-chave: hibrídos triplóides
cultura de tecidos
protoplasto
milheto
capim-elefante
Tissue culture
Protoplasts
Napier grass
Pearl millet
Triploid hybrids
Data da publicação: 24-Set-2014
Referência: TIMBÓ, A. L. de O. Obtenção de protoplastos de híbridos triplóides entre o capim-elefante e o milheto. 2007. 44 p. Dissertação (Mestrado em Genética e Melhoramento de Plantas)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2007.
Resumo: Buscando gerar maior variabilidade que resulte em avanços na obtenção de cultivares superiores os programas de melhoramento genético do capim-elefante (2n = 4x = 28) realizam o cruzamento desta espécie com o milheto (2n = 2x = 14) Entretanto, o híbrido triplóide (3x) resultante é infértil impossibilitando sua utilização nesses A restauração da fertilidade pode ser conseguida pela duplicação cromossômica utilizando-se antimitóticos Porém esse processo de duplicação tem resultado na obtenção de plantas na maioria mixoplóides e poucas hexaplóides estáveis Devido a essa dificuldade este trabalho teve por objetivo estudar a germinação de sementes in vitro e a obtenção de protoplastos dos híbridos triplóides como base para futuros trabalhos de duplicação cromossômica via fusão de protoplastos e subseqüente regeneração de híbridos hexaplóides estáveis No experimento de germinação in vitro o meio de cultura utilizado constituiu-se do MS com (1 1/2 e 1/4) das concentrações de sais acrescidos de sacarose (1*5% e 3%) Avaliou-se aos 15 dias a porcentagem de sementes germinadas e aos 30 dias o crescimento e desenvolvimento das plântulas in vitro Para o experimento de obtenção de protoplastos foram utilizados explantes de mesofilo de plantas cultivadas in vitro e in vivo ou de calos de híbridos triplóides Após a assepsia das folhas in vivo as mesma foram seccionadas transversalmente em tiras de 1 a 1*5 mm de largura e transferidas para placas de Petri de 90 x 15 mm contendo 15 mL de meio CPW + 13% manitol Após a pré-plasmolise soluções enzimáticas em diferentes concentrações da enzima celulase R-10 (0*5 %; 1 %; 1*5 %; 2*0 %) acrescidas de 0*2% macerozyme e 0*1% driselase ou 1% pectolyase Y-23 e 0*5% hemicelulase A digestão enzimática foi monitorada durante 5 horas no escuro sob agitação de 40 rpm a 26±2°C O meio mais eficiente para a germinação e o crescimento das plântulas in vitro do híbrido foi aquele com a metade dos sais do MS acrescido de 3% de sacarose Obtiveram-se protoplastos a partir de folhas in vitro e in vivo de híbridos triplóides entre o capim-elefante e o milheto sendo as folhas in vitro as melhores fontes de explante quando digeridas pela solução enzimática 2 por cinco horas para o híbrido H2 e em três horas de digestão pela solução enzimática 5 para o híbrido H3.
Searching to generate variability that results in advances in the development of superior cultivars the genetic improvement programs accomplish crosses between Napier grass (2n = 4x = 28) and pearl millet (2n = 2x = 14) However the triploid hybrid (3x) is infertile disabling its use in genetic improvement programs Fertility recovery can be obtained by chromosome duplication using anti-mitotics However this methodology generates many mixoploids and few stable hexaploids. Due to this difficulty this work aimed to study in vitro seed germination and protoplasts production of triploid hybrids as base to future works of chromosome duplication via protoplast fusion and subsequent regeneration of hexaploid hybrids Seeds were germinated in vitro using full-strength 1/2 and 1/4 MS-salts supplemented with sucrose (1*5% and 3%) The percentage of germination was evaluated after 15 days and in vitro plantlet growth and development after 30 days For protoplasts production in vitro and in vivo plant mesophylls were used or triploid hybrids callus After explant surface disinfection leaves were transversally cut in strips of 1-1*5 mm wide and transferred to 90 x 15 mm petri dishes containing 15 mL of CPW medium + 13% mannitol After the pre-plasmolise enzymatic solutions were tested in different concentrations of celulase R-10 enzyme (0*5%; 1*0%; 1*5%; 2*0%) and added 0*2% macerozyme and 0*1% driselase or 1*0% pectolyase Y-23 and 0*5% hemicelulase The enzymatic digestion was monitored every hour for a 5 h period in the dark under 40 rpm shaking at 26±2°C The most efficient culture medium for in vitro germination and seedling growth was half-strength MS-salts supplemented with 3% sucrose Protoplasts were obtained from in vitro and in vivo leaves of triploid hybrids (Napier grass x pearl millet) but the in vitro leaves were the best source of explants when digested with enzymatic solution 2 for five hours for the H2 hybrid For the H3 hybrid three hours digestion with enzymatic solution 5 was the most efficient.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/3955
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções:DBI - Genética e Melhoramento de Plantas - Mestrado (Dissertações)

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