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Título: Resfriamento e congelamento de embriões de dourado (Salminus brasiliensis), piracanjuba (Brycon orbignyanus) e piapara (Leporinus obtusidens)
Autor : Miliorini, Aléssio Batista
Primeiro orientador: Murgas, Luis David Solis
Primeiro membro da banca: Rosa, Priscila Vieira e
Mian, Gláucia Frasnelli
Lacreta Júnior, Antônio Carlos Cunha
Benjamin, Laércio dos Anjos
Área de concentração: Ciências Veterinárias
Palavras-chave: Criopreservação
Crioprotetores
Dimetilsulfóxido
Metanol
Peixe
Cryopreservation
Cryoprotectants
Dimethylsulfoxide
Methanol
Fishes
Data da publicação: 2013
Agência(s) de fomento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Referência: MILIORINI, A. B. Resfriamento e congelamento de embriões de dourado (Salminus brasiliensis), piracanjuba (Brycon orbignyanus) e piapara (Leporinus obtusidens). 2012. 138 p. Tese (Doutorado em Ciências Veterinárias)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2012.
Resumo: A criopreservação de gametas e embriões de espécies aquáticas oferece muitos benefícios para as áreas de conservação da biodiversidade, mas, até o momento, nenhum protocolo foi capaz de obter embriões viáveis após o congelamento com a reprodutibilidade e eficiência desejadas. O dourado (Salminus brasiliensis), a piracanjuba (Brycon orbignyanus) e a piapara (Leporinus obtusidens) são espécies de peixes reofílicas e compartilham praticamente o mesmo habitat na América do Sul. A construção de barragens e o desmatamento da mata ciliar são alguns dos fatores descaracterizadores do ambiente aquático natural, e explicam porque, nas últimas décadas, suas populações têm diminuído intensivamente. Nestes estudos, objetivou-se estudar os efeitos do resfriamento e do congelamento sobre os embriões de dourado, piaracanjuba e piapara. Foram utilizados embriões de quatro casais de cada espécie, mergulhados em soluções contendo metanol ou dimetilsulfóxido (DMSO) 5, 8 ou 11%, sob resfriamento (-2°C) ou não. Os demais grupos controle foram compostos por embriões não adicionados de crioprotetor e incubados à temperatura ambiente ou resfriados. Outro grupo de embriões foi congelado em N2(l) após banho nas mesmas soluções do resfriamento. Ambos os crioprotetores apresentaram-se pouco tóxicos à temperatura ambiente para os embriões das três espécies. O metanol promoveu as maiores taxas de eclosão médias para os embriões resfriados de dourado e de piracanjuba e com preservação das características morfológicas para esta última independentemente da concentração. Já os embriões de piapara foram muito sensíveis ao resfriamento, exceto quando adicionados de DMSO. A adição de crioprotetores nestes embriões não implicou no aparecimento de lesões durante o resfriamento. Por sua vez, irregularidade entre as camadas de blastômeros e da membrana sincicial do vitelo, além de glóbulos de vitelo dispersos para a periferia do saco vitelínico foram observadas após o resfriamento dos embriões das demais espécies. Três embriões de piracanjuba tratados com metanol 8% e quatro com metanol 11%, além de cinco embriões de piapara também tratados com metanol 11% foram recuperados e incubados após o descongelamento. Deles, dois da primeira e quatro da segunda espécie desenvolveram-se até a formação da placa neural e dos dois primeiros somitos, respectivamente, demonstrando ser possível a preservação de seus embriões de por meio do congelamento rápido. Antes disso, porém, é imprescindível que se aprimore o conhecimento sobre as características biomoleculares destes embriões a fim de se explorar o potencial dos procedimentos aqui utilizados.
The cryopreservation of gametes and embryos of aquatic species offers many benefits to biodiversity conservation, but so far, no protocol was able to obtain viable embryos with the desired efficiency and reproducibility after freezing . Dourado (Salminus brasiliensis), piracanjuba (Brycon orbignyanus) and piapara (Leporinus obtusidens) are rheophilic fish species and share almost the same habitat in South America. The construction of dams and deforestation of riparian vegetation are some of the factors which alter natural aquatic habitat, and explain why, in recent decades, their populations have declined so intensely. This work aimed at studying the effects of cooling and freezing over dourado, piracanjuba and piapara embryos. Embryos from four pairs of each species were immersed in solutions containing 5%, 8% and 11% of methanol or dimethylsulfoxide (DMSO), maintained under cooling (-2°C) or not. The remaining control groups were composed of embryos without cryoprotectants, incubated at room temperature or cooled. Another group of embryos was frozen in N2(l) after bathing in the same cooling solutions. Both cryoprotectants presented low toxicity at room temperature for the embryos of the three species. Methanol promoted the highest hatching mean rates for dourado and piracanjuba cooled embryos and the preservation of morphological characteristics for the last, regardless of concentration. In turn, piapara embryos were too sensitive to cooling, except when added DMSO. The addition of cryoprotectants to these embryos did not result in the appearance of lesions during cooling. The irregularity between the blastomere layers and yolk syncytial membrane, in addition to yolk globules dispersed to yolk sac periphery, were observed after cooling for the remaining species. Three piracanjuba embryos treated with 8% methanol, four with 11% methanol, and five piapara embryos also treated with 11% methanol were recovered and incubated after thawing. Among these, two of the first specie and four of second have developed until the formation of the neural plate and two-somite stages, respectively, proving possible the preservation of their embryos by fast freezing. However, it is essential to first enhance the knowledge about the biomolecular characteristics of these embryos in order to explore the potential of the procedures used in this work.
metadata.teses.dc.description: Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, área de concentração em Ciências Veterinárias, para a obtenção do título de Doutor.ARTIGO 1 Cooling and freezing of Dourado (Salminus brasiliensis) and Piracanjuba (Brycon orbignyanus) embryos, two endangered brazilian teleost fishes.ARTIGO 2 Cooling and freezing of embryos of a reophilic fish, Piapara (Leporinus obtusidens.)
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/406
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
Aparece nas coleções:DMV - Ciências Veterinárias - Doutorado (Teses)



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