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Título: Óleos essenciais de Cinnamodendron dinisii Schwacke e Siparuna guianensis Aublet: composição química, caracterização das estruturas secretoras e avaliação do potencial biológico
Autor : Andrade, Milene Aparecida
Primeiro orientador: Cardoso, Maria das Graças
metadata.teses.dc.contributor.advisor-co: Batista, Luís Roberto
Primeiro membro da banca: Castro, Evaristo Mauro de
Figueiredo, Ana Cristina da Silva
Preté, Paulo Sérgio Castilho
Marcussi, Silvana
Palavras-chave: Pimenteira
Negramina
Antioxidantes
Antioxidants
Data da publicação: 1-Jul-2013
Agência(s) de fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
Referência: ANDRADE, M. A. Óleos essenciais de Cinnamodendron dinisii Schwacke e Siparuna guianensis Aublet: composição química, caracterização das estruturas secretoras e avaliação do potencial biológico. 2013. 226 p. Tese (Doutorado em Agroquímica) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2013.
Resumo: Objetivou-se neste estudo determinar a composição química dos óleos essenciais de Cinnamodendron dinisii Schwacke (pimenteira) e Siparuna guianensis Aublet (negramina), as suas atividades antioxidante, antibacteriana, antifúngica, tripanocida, citotóxica, hemolítica e avaliar a capacidade de causarem danos no DNA de linfócitos humanos, além de caracterizar suas estruturas secretoras. A obtenção dos óleos essenciais foi realizada pela técnica de hidrodestilação utilizando o aparelho de Clevenger modificado, e a identificação e quantificação dos constituintes, pelas análises em CG/EM e CG-DIC. A atividade antioxidante foi avaliada utilizando sistema β-caroteno/ácido linoleico e o método de sequestro de radicais DPPH. A avaliação da atividade antibacteriana foi realizada por meio da técnica de difusão cavidade em ágar, e a atividade antifúngica, pela técnica de difusão em disco. A atividade tripanocida foi avaliada sobre formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi e a citotóxica sobre células Vero; ambas foram determinadas pelo método do MTT. A atividade hemolítica foi avaliada por medidas espectrofotométricas da liberação de hemoglobina de eritrócitos. Os danos causados no DNA de células de linfócitos foram avaliados pelo ensaio do cometa e a caracterização das estruturas secretoras foi feita por MEV e por testes histoquímicos com os reagentes de Nadi, Sudan IV e cloreto férrico. Os rendimentos dos óleos essenciais foram de 2,03% e 0,31% e o teor de umidade foram 60,67% e 64,67% para as folhas frescas de C. dinisii e S. guianensis, respectivamente. Nas análises cromatográficas, os constituintes majoritários encontrados no óleo essencial de C. dinisii foram o α-pineno (35,41%), β-pineno (17,81%), sabineno (12,01%) e o biciclogermacreno (7,59%). No óleo essencial de S. guianensis, foram identificados como constituintes majoritários o β-mirceno (13,14%), germacreno-D (8,68%) e o biciclogermacreno (16,71%). A atividade antioxidante apresentou-se baixa pelo teste β-caroteno/ácido linoleico e não foi evidenciada pelo teste do DPPH, para ambos os óleos avaliados. A atividade tripanocida obtida foi de CI50 = 282,93 µg mL-1 para óleo de C. dinisii e 124,00 µg mL-1 para S. guianensis, valores considerados elevados. Os dois óleos essenciais apresentaram pequeno efeito inibitório sobre bactérias, apresentando altos valores de CMI e efeito inibitório satisfatório sobre os fungos avaliados, com baixos valores de CMI. A atividade citotóxica para células Vero encontrada foi elevada (CC50 =35,72 µg mL-1 para óleo de C. dinisii e 38,01 µg mL-1, para S. guianensis). Os óleos essenciais em estudo apresentaram o efeito hemolítico elevado em todas as concentrações de hematócritos (Ht) avaliadas. Pelo ensaio do cometa, observou-se que os óleos causaram danos significativos ao DNA dos linfócitos, sendo o óleo essencial de C. dinisii o maior causador de danos. A caracterização das estruturas secretoras dos óleos essenciais revelou a presença de células internas de secreção (cavidades secretoras) em ambas as espécies avaliadas.
The aims of this study were to determine the chemical composition of essential oils of Cinnamodendron dinisii Schwacke (pimenteira) and Siparuna guianensis Aublet (negramina), their antioxidant, antibacterial, antifungal, trypanocidal, cytotoxic and hemolytic activity and to evaluate their capacity to cause damage in human lymphocyte DNA, besides characterizing their secretory structures. The obtaining of the essential oils was conducted by the hydrodistillation technique using a modified Clevenger apparatus, and the identification and quantification of constituents, by GC/MS and GC-FID analyses. The antioxidant activity was evaluated using the β-carotene/linoleic acid system and the DPPH radical sequestering method. The evaluation of the antibacterial activity was conducted through the agar well diffusion technique, and the antifungal activity, by the disk diffusion technique. The trypanocidal activity was evaluated on Trypanosoma cruzi epimastigote forms and the cytotoxic on Vero cells; both were determined by the MTT method. The hemolytic activity was evaluated by spectrophotometric measurements of the hemoglobin (Hb) released of from the erythrocytes. The damage caused in lymphocyte cell DNA was appraised by the comet assay and the characterization of the secretory structures was made by SEM and through histochemical tests with the Nadi reagents, Sudan III and ferric chloride. The yields of the essential oils were 2.03% and 0.31% and the moisture contents were 60.67% and 64.67% for the fresh leaves of C. dinisii and S. guianensis, respectively. In the chromatographic analyses, the majority constituents found in the essential oil of C. dinisii were the α-pinene (35.41%) β-pinene (17.81%), sabinene (12.01%) and the bicyclogermacrene (7.59%). In the essential oil of S. guianensis, were identified as majority constituents the β-myrcene (13.14%), germacrene D (8.68%) and the bicyclogermacrene (16.71%). The antioxidant activity by the β-carotene/linoleic acid test was low and was not evidenced by the DPPH test, for both appraised oils. The trypanocidal activity obtained was IC50 = 282.93 µg mL-1 for C. dinisii oil and 124.00 µg mL-1 for S. guianensis, values considered high. The two essential oils presented little inhibitory effect on bacteria, presenting high MIC values and satisfactory inhibitory effect on the fungi appraised, with low MIC values. The cytotoxic activity for Vero cells found was high (CC50 =35.72 µg mL-1 for C. dinisii oil and 38.01 µg mL-1, for S. guianensis). The essential oils under study presented a elevated hemolytic effect in all of the hematocrit concentrations (Ht) appraised. Through the comet assay, it was observed that the oils caused significant damage to lymphocyte DNA, and the essential oil of C. dinisii caused the higher damage. The characterization of the secretory structures of the essential oils revealed the presence of internal secretion cells (secretor cavities) in both appraised species.
metadata.teses.dc.description: Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Agroquímica, para a obtenção do título de Doutor.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/773
Publicador: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Idioma: pt_BR
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