dissertação
Toxicidade de fungicida comercial a base de tebuconazol em Danio rerio
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Universidade Federal de Lavras
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Departamento de Medicina Veterinária
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Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
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Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Agência de fomento
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Tipo de impacto
Áreas Temáticas da Extenção
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável
Dados abertos
Resumo
Avaliar os efeitos da exposição de diferentes concentrações de tebuconazol, princípio ativo de fungicidas comerciais, sobre embriões e adultos de Danio rerio, através de ensaio de ansiedade, glicemia, danos no DNA e desenvolvimento embrionário. Foram realizados dois ensaios, sendo o primeiro com adultos da espécie visando avaliar parâmetros de estresse através do teste de mergulho em tanque novo, glicose plasmática e genotoxicidade com os testes de micronúcleo e ensaio cometa. No segundo ensaio, avaliou-se a toxicidade do fungicida influenciando o desenvolvimento embrionário de zebrafish. No ensaio 1, utilizou-se 320 exemplares adultos de D. rerio divididos em oito aquários, tendo sido expostos às concentrações de 0; 100; 200 e 300 µg/L de tebuconazol com suas respectivas réplicas nos tempos de 24, 72 e 96 horas. Após cada período de exposição, 10 animais foram retirados de cada aquário, levados para filmagem do teste de mergulho em tanque novo e em seguida r ealizados os procedimentos de coleta de sangue e brânquias para a realização dos demais. No ensaio 2, embriões de zebrafish foram expostos às concentrações de 0; 12,5; 25; 50; 100 e 200 µg/L de tebuconazol por um período de 96h, sendo analisadas diariamente as alterações morfológicas e taxa de sobrevivência. Os resultados encontrados mostraram desvio comportamental de zebrafish, em que os animais expostos ao tebuconazol apresentaram-se mais ansiosos, diminuindo seu tempo de permanência na superfície do aquário. Para a glicose plasmática (mg/dL), não houve diferença significativa (p>0,05). Para os testes de micronúcleo e ensaios cometa à exposição de D. rerio ao tebuconazol resultou em aumento significativo (p<0,05) de danos ao DNA em função do tempo de exposição e das diferentes concentrações de tebuconazol. Nos embriões, o tebuconazol não causou nenhuma malformação durante os estágios embrionários. As taxas de sobrevivência não foram alteradas nas doses de 12,5; 25 e 50 µg/L, apenas a dose de 100 µg/L foi capaz de atuar diminuindo a sobrevivência. Ao analisar diferentes doses dentro de um mesmo período de desenvolvimento embrionário, houve diferença significativa (p<0,001), em que as maiores taxas de sobrevivência foram obtidas nas menores concentrações de tebuconazol. A concentração de 200 µg/L foi considerada altamente tóxica para os embriões, pois em menos de 24hpf todos os embriões haviam morrido. Os resultados obtidos neste estudo permitem concluir que o tebuconazol possui efeitos tanto nos adultos quanto em embriões de Danio rerio, gerando fragmentação no material genético e alterações no comportamento dos adultos, além de induzir letalidade nos embriões.
Abstract
This work aimed at evaluating the effects of the exposure to different concentrations of tebuconazole, active principal for commercial fungicides, over Danio rerio embryos and adults, by means of anxiety, glucose, DNA damage and embryonic development trials. Two trials were conducted, the first with adults, aiming at evaluating stress parameters by means of new tank dive, plasma glucose and genotoxicity tests, as well as micronuclei test and comet trial. In the second trial, we evaluated the toxicity of the fungicide, influencing the embryonic development of zebrafish. In trial 1, 320 specimens of adult D. rerio, divided into 8 tanks, having been exposed to the concentrations of 0, 100, 200 and 300 µg/L of tebuconazole, with the respective replicates at times 24, 72 and 96 hours. After each period of exposure, 10 animals were removed from each tank, taken to filming of the new tank dive test having, subsequently, collected blood and gill samples to conduct the remaining tests. In trial 2, zebrafish embryos were exposed to the concentrations of 0, 12.5, 25, 50, 100 and 200 µg/L of tebuconazole for a period of 96 hours, daily analyzing morphological changes and survival rate. The results show a behavioral deviation of the zebrafish, when the animals exposed to tebuconazole were more anxious, reducing the time of permanence at the surface of the tank. For plasmatic glucose (mg/dL) there was no significant difference (p>0.05). For the micronuclei test and comet trial, the exposure to tebuconazole resulted in a significant increase (p<0.05) of damage to the DNA in function of the time of exposure and different concentrations of tebuconazole. For the embryos, the tebuconazole caused no malformation during the embryonic stages. The survival rates were not alter ed with the doses of 12.5, 25 and 50 µg/L. Only the dose of 100 µg/L was capable of decreasing the survival. When analyzing the different doses within a same period of embryonic development, there was significant difference (p<0.001), in which the higher survival rates were obtained at the lowest concentrations of tebuconazole. The concentration of 200 µg/L was considered highly toxic to the embryos, given that, in less than 24 hours, all embryos had died. The results obtained in this study allow us to conc lude that tebuconazole has the same effects over Danio rerio embryos and adults, causing fragmentation of the genetic material and changes in the behavior of the adults, in addition to reducing embryo lethality.
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CASTRO, T. F. D. Toxicidade de fungicida comercial a base de tebuconazol em Danio rerio. 2016. 78 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2016.