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Inoculação, transmissão e detecção por Bio-PCR de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli em sementes de feijão

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Universidade Federal de Lavras

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Escola de Ciências Agrárias de Lavras ( ESAL)

Departamento

Departamento de Fitopatologia

Programa de Pós-Graduação

Departamento de Fitopatologia

Agência de fomento

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES

Tipo de impacto

Áreas Temáticas da Extenção

Objetivos de Desenvolvimento Sustentável

Dados abertos

Resumo

The common bacterial blight (CBB) of the bean caused by Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) assumes economical importance due to its wide distribution, difficult control, and because the seed is the pathogen’s principal mean of survival and dissemination. Studies of epidemics and control methods may be conducted if lots of seeds uniformly contaminated with Xap are available and its germination power is preserved. Thus, the objectives of this work were to develop a technique for artificial inoculation of the bean seeds with Xap, using water restriction on the culture medium, maintaining the germination power of the seeds, and optimizing the Bio-PRC technique for the detection of bacteria from seed extracts. The results indicated that the water restriction of the medium 523 using mannitol constituted a viable technique for Xap inoculation in bean seeds, since it maintained germination percentage; the periods of exposure to the bacteria, of 24 and 36 hours during the inoculation under water restriction, allowed a larger percentage of detection and transmission of the pathogen. A larger percentage of infected seeds and larger percentage of Xap transmission to the cotyledons and primary leaves were observed for the Carioca cultivar. The modified Bio-PCR allowed the amplification of the DNA fragment characteristic of Xap from a colony with 72 hours of incubation with repeatability. It was possible to detect an infected seed in lots of 10, 100, 500 and 1000 seeds considered healthy.
O crestamento bacteriano (CB) do feijoeiro causado por Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) assume importância econômica devido à sua ampla distribuição, difícil controle, e pela semente ser o principal meio de sobrevivência e disseminação do patógeno. Estudos de epidemias e de métodos de controle poderão ser conduzidos se houver disponibilidade de lotes de sementes uniformemente contaminadas com Xap e o seu poder germinativo for preservado. Assim, os objetivos do autor com este trabalho foi o de desenvolver uma técnica para inoculação artificial de sementes de feijão com Xap pelo uso da restrição hídrica do meio de cultura, mantendo-se o poder germinativo das sementes, e adaptar a técnica de Bio-PCR para detecção da bactéria a partir de extratos de sementes. Os resultados indicaram que a restrição hídrica do meio 523 pelo uso do manitol constituiu uma técnica viável para inoculação de Xap em sementes de feijão, pois se manteve a porcentagem de germinação; os períodos de exposição à bactéria, de 24 e 36 h durante a inoculação sob restrição hídrica, permitiram maior porcentagem de detecção e transmissão do patógeno. Maior porcentagem de sementes infectadas e maior porcentagem de transmissão de Xap para os cotilédones e folhas primárias foram observadas para a cultivar Carioca. A Bio-PCR modificada permitiu a amplificação do fragmento de DNA característico de Xap a partir de uma colônia com 72 h de incubação com repetibilidade. Foi possível detectar uma semente infectada em lotes de 10, 100, 500 e 1000 sementes consideradas sadias.

Abstract

Descrição

Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Agronomia, área de concentração em Fitopatologia, para a obtenção do título de Doutor.

Área de concentração

Fitopatologia

Agência de desenvolvimento

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Citação

KOBAYASTI, L. Inoculação, transmissão e detecção por Bio-PCR de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli em sementes de feijão. 2012. 126 p. (Doutorado em Fitopatologia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2012.

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