dissertação
Técnicas moleculares para a caracterização de Saccharomyces cerevisisae associadas à produção de cachaça
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Resumo
As leveduras, principalmente Saccharomyces cerevisiae, são os microrganismos responsáveis pela conversão dos açúcares do caldo de cana-de-açúcar em álcool e CO2 durante o processo fermentativo para produção de cachaça. O objetivo deste trabalho foi utilizar as técnicas moleculares de PCR, PFGE e RFLP/mtDNA na caracterização de leveduras isoladas de alambiques do Sul de Minas Gerais. Foram utilizadas para caracterização molecular, leveduras inicialmente identificadas por técnicas morfológicas e bioquímicas. Das 106 leveduras caracterizadas por técnicas tradicionais, 36 apresentaram produto de amplificação por PCR utilizando-se primer específico para leveduras S. cerevisiae. A caracterização pela técnica de PFGE mostrou 9 diferentes perfis, onde 2 foram semelhantes ao marcador S. cerevisiae. A análise de restrição do mtDNA com 4 diferentes enzimas mostrou 10 diferentes perfis, dos quais, 3 para as enzimas Rsa I e Hae III e 2 para as enzimas Hind III e Hinf I. Foi verificado que as técnicas de PCR, PFGE e RFLP-mtDNA utilizando-se a enzima Hinf I mostraram-se eficientes na identificação de leveduras S. cerevisiae, podendo ser utilizadas isoladas ou associadas.
Abstract
Yeasts, mainly Saccharomyces cerevisiae, are microorganisms responsible by conversion of sucrose from sugarcane juice to alcohol and CO2 during the fermentative process of cachaça. The aim of this work was to utilize molecular techniques such as PCR, PFGE and RFLP/mtDNA in the characterization of yeasts isolated of alambiques from South of Minas Gerais. Yeasts were initially identified by morphological and physiological methods and them characterized by molecular techniques. Of one hundred and six yeasts characterized by traditional techniques, 36 showed product of amplification by PCR using the specific primer to S. cerevisisiae. The characterization by PFGE technique showed 9 different profiles, where 2 of them were similar to the S. cerevisiae utilized as standard. The restriction analysis of the mtDNA using 4 different enzymes showed 10 different profiles, 3 using Rsa I and Hae III enzymes and 2 when Hind III e Hinf I enzymes were used. It was verified that the PCR, PFGE and mtDNA-RFLP with Hinf I enzyme showed efficiency in the identification of S. cerevisiae yeasts and these methods can be used isolated or associated.
Descrição
Área de concentração
Microbiologia Agrícola
Agência de desenvolvimento
Palavra chave
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Resumen
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Citação
BERNARDI, T. L. Técnicas moleculares para a caracterização de Saccharomyces cerevisiae associadas à produção de cachaça. 2007. 38 p. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Agrícola)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2007.