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Efeito da composição e osmolalidade do diluidor do sêmen criopreservado de piracanjuba Brycon orbignyanus (Characiformes)

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Resumo

A piracanjuba Brycon orbignyanus é um peixe da ordem Characiformes, nativo da América do Sul. As mudanças no curso do rio, urbanização, poluição e construção de hidrelétricas são algumas das razões pelas quais o B. orbignyanus está atualmente classificado como uma espécie ameaçada de extinção. A criopreservação de sêmen de peixes fornece uma ferramenta pela qual a reprodução é otimizada, melhorando os programas de conservação e melhoramento genético das espécies. Um meio de congelamento ideal deve evitar o início da motilidade espermática, durante o armazenamento. Objetivouse, neste trabalho, avaliar o efeito da composição e da osmolalidade do diluidor, na qualidade do sêmen criopreservado de B. orbignyanus. Os machos de B. orbignyanus foram selecionados em tanques de terra na Estação de Piscicultura da CEMIG, em Itutinga, durante o período reprodutivo (Dezembro a Fevereiro). Os machos receberam dose única de extrato pituitário de carpa e o sêmen foi coletado 8-10 horas depois. A osmolalidade do plasma seminal foi mensurada (249 mOsm kg-1). Oito diluidores compreendendo a combinação de duas composições (NaCl e Glicose) e quatro osmolalidades (285, 325, 365 e 405 mOsm kg-1) foram testados. O metilglicol foi usado como agente crioprotetor. O sêmen diluído foi envasado em palhetas de 0,25mL, congelado em botijão de vapor de nitrogênio (dry shipper) e armazenado em botijão de nitrogênio líquido. As palhetas foram descongeladas em banho- maria a 60°C por três segundos e o sêmen foi imediatamente avaliado quanto à taxa de motilidade e velocidades (curvilinear = VCL; linear = VSL e média de percuso= VAP), utilizando-se o sistema CASA. A composição e osmolalidade do diluidor afetaram a qualidade espermática pós-descongelamento. Em geral, o sêmen criopreservado em NaCl foi de melhor qualidade do que o sêmen criopreservado em glicose, e a 285 e 325 mOsm kg-1 melhor do que a 365 e 405 mOsm kg-1 . A maior qualidade pós-descongelamento foi observada apenas nas amostras congeladas em NaCl a 285 mOsm kg-1, com motilidade acima de 60% e VCL acima de 140 μm s-1. O sêmen de B. orbignyanus deve ser criopreservado em solução de NaCl preparada em uma osmolalidade superior a do plasma seminal e usado, tanto para fins de aquicultura, quanto para programas de conservação, uma vez que B. orbignyanus é uma espécie ameaçada.
The piracanjuba Brycon orbignyanus is a Characiformes order fish, native to South America. Changes in the river stream, urbanization, pollution and hydroelectric dams are some of the reasons why the B. orbignyanus is currently classified as an endangered species. The cryopreservation of fish sperm provides a tool by which reproduction is optimized, improving breeding and fish conservation programs. An optimum freezing medium should prevent the initiation of sperm motility during storage. The aim of this study was to evaluate the effects of extender composition and osmolality on post-thaw quality of B. orbignyanus sperm. B. orbignyanus males were selected from earthen ponds at the Fish Culture Station of the Minas Gerais Power Company (CEMIG) in the city of Itutinga, MG, Brazil, during the spawning season (December to February). Males received a single intramuscular dose of carp pituitary extract and sperm were hand-stripped 8-10 h later. Seminal plasma osmolality was measured (249 mOsm kg-1) Eight extenders comprising combinations of two compositions (NaCl and glucose) and four osmolalities (285, 325, 365 and 405 mOsm kg-1) were tested. Methyl glycol was used as cryoprotectant. Diluted sperm was loaded into 0.25 mL straws, frozen in a nitrogen vapor vessel (dry shipper) and stored in a liquid nitrogen vessel. Straws were thawed in a water bath at 60°C for 3 s and sperm was immediately evaluated for motility rate and velocities (curvilinear = VCL; straight line = VSL; average path = VAP), using CASA system. Both extender composition and osmolality affected post-thaw sperm quality. In general, sperm cryopreserved in NaCl was of better quality than that sperm cryopreserved in glucose and at 285 and 325 mOsm kg-1 better than that at 365 and 405 mOsm kg-1. High post-thaw quality, was observed only in samples frozen in NaCl at 285 mOsm kg-1, with motility above 60% and VCL above 140 μm s-1, Sperm should be cryopreserved in NaCl solution prepared at an osmolality just above seminal plasma osmolality, and used for both aquaculture purposes and for conservational programs, since B. orbignyanus is a threatened species.

Abstract

Descrição

Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras como parte das exigências do Programa de Pós- Graduação em Zootecnia, área de concentração em Produção Animal, para a obtenção do título de Mestre.

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GALVIS, D. I. L. Efeito da composição e osmolalidade do diluidor do sêmen criopreservado de piracanjuba Brycon orbignyanus (Characiformes). 2014. 62 p. Tese (Doutorado em Genética e Melhoramento de Plantas) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2014.

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