dissertação
Tipo de explante e reguladores de crescimento vegetal na indução de calos, produção de compostos fenólicos e atividade antioxidante em Amburana cearensis
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Universidade Federal de Lavras
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Escola de Ciências Agrárias de Lavras (ESAL)
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Departamento de Biologia (DBI)
Programa de Pós-Graduação
Programa de Pós-Graduação em Agronomia/Fisiologia Vegetal
Agência de fomento
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
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Tecnológico
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Educação
Meio ambiente
Tecnologia e produção
Meio ambiente
Tecnologia e produção
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável
ODS 12: Consumo e produção responsáveis
Dados abertos
Resumo
Amburana cearensis, espécie nativa do Brasil, é valorizada pela madeira e benefícios medicinais de seus metabólitos. A extração direta desses compostos pode levar à extinção da espécie, tornando a cultura de tecidos uma alternativa eficaz para a produção de metabólitos em ambiente controlado.O objetivo deste estudo foi avaliar o tipo de explante e de reguladores de crescimento vegetal (RCV) na indução de calos, produção de compostos fenólicos e atividade antioxidante em A. cearensis. Sementes de A. cearensis foram germinadas in vitro e após 30 dias, as plântulas foram seccionadas em quatro tipos de explantes: folha, cotilédone, epicótilo e raiz. Esses explantes foram colocados em meioMurashige-Skoog(MS)com combinações de RCV(Thidiazuron (TDZ)+ácido 1- naftalenacético (ANA) e TDZ+ ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D))para a formação e crescimento de calos. Após a indução, os três tratamentos com maior crescimento foram analisados após 30 dias para determinar o teor fenólico total (TPC), o teor total de flavonoides (CTF) e a atividade antioxidante, utilizando os ensaios 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), 2,2′-azino-bis(ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) (ABTS) e fosfomolibdênio. As combinações deRCV foram eficazes na indução e crescimento de calo. No entanto, as combinações 5 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1 ANA (5T+1A), 1 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1ANA (1T+1A), 1 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1 2,4-D (1T+1-2,4D) resultaram em maior (p ≤ 0,05) massa nos calos de todos os explantes, destacando-se folhas e cotilédones. O calo de epicótilo com a combinação 1T+1A e 1T+1-2,4D apresentou maiores teores (p ≤ 0,05) de compostos fenólicos, enquanto o cotilédone com as combinações 5T+1A e 1T+1A, maiores teores de flavonoides e cumarina, respectivamente, em comparação com a raiz e a folha.A atividade antioxidante foi muito variável de acordo com o tipo de explante e a combinação de RCV. Nos calos de epicótilo e raiz, não houve relação entre compostos fenólicos e atividade antioxidante. Em contraste, nos calos de folha e cotilédone, assim como na planta de A. cearensis, houve correlação com ao menos um método antioxidante (DPPH, ABTS e fosfomolibdênio). Todos os calos, assim como a planta mãe, continham compostos fenólicos e apresentaram atividade antioxidante em diferentes concentrações, o que demonstra sua capacidade de produzir os mesmos compostos que a planta original. Em conclusão, embora não se tenha encontrado uma relação direta entre a atividade antioxidante e os compostos fenólicos, os calos têm compostos fenólicos, incluindo cumarinas e flavonoides, o que os torna potencialmente valiosos para a indústria farmacêutica.
Abstract
Amburana cearensis, a native species of Brazil, is valued for its wood and the medicinal benefits of its metabolites. Direct extraction of these compounds can lead to the species' extinction, making tissue culture an effective alternative for producing metabolites in a controlled environment. The aim of this study was to evaluate the type of explant and plant growth regulators (PGRs) in callus induction, phenolic compound production, and antioxidant activity in A. cearensis. Seeds of A. cearensis were germinated in vitro, and after 30 days, the seedlings were sectioned into four types of explants: leaf, cotyledon, epicotyl, and root. These explants were placed in Murashige-Skoog (MS) medium with combinations of PGRs (Thidiazuron (TDZ) + 1-naphthaleneacetic acid (ANA) and TDZ + 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D)) for callus formation and growth. After induction, the three treatments with the highest growth were analyzed after 30 days to determine total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC), and antioxidant activity, using the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), and phosphomolybdenum assays. The PGR combinations were effective in callus induction and growth. However, the combinations 5 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1 ANA (5T+1A), 1 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1ANA (1T+1A), 1 mg L-1 TDZ + 1 mg L-1 2,4-D (1T+1-2,4D) resulted in the greatest (p ≤ 0.05) mass of callus from all explants, particularly leaves and cotyledons. The epicotyl callus with the combination 1T+1A and 1T+1-2,4D showed higher (p ≤ 0.05) levels of phenolic compounds, while the cotyledon with the combinations 5T+1A and 1T+1A showed higher levels of flavonoids and coumarin, respectively, compared to root and leaf. Antioxidant activity varied significantly according to the explant type and PGR combination. In epicotyl and root calluses, there was no correlation between phenolic compounds and antioxidant activity. In contrast, in leaf and cotyledon calluses, as well as in the parent plant of A. cearensis, there was a correlation with at least one antioxidant method (DPPH, ABTS, and phosphomolybdenum). All calluses, as well as the parent plant, contained phenolic compounds and exhibited antioxidant activity at different concentrations, demonstrating their ability to produce the same compounds as the original plant. In conclusion, although a direct relationship between antioxidant activity and phenolic compounds was not found, the calluses contain phenolic compounds, including coumarins and flavonoids, making them potentially valuable for the pharmaceutical industry.
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MENDOZA CHUMO, D. R. Tipo de explante e reguladores de crescimento vegetal na indução de calos, produção de compostos fenólicos e atividade antioxidante em Amburana cearensis. 2024. 49 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fisiologia Vegetal) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2024.
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