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Diferentes reguladores de crescimento na indução de calos e pró-embrióides em anteras de cafeeiro
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Resumo
O melhoramento do cafeeiro (Coffea arabica), tem sido feito através de métodos convencionais, os quais são muito morosos até se obter o material genético desejado, e este tempo pode ser reduzido através da obtenção de haplóides em gerações segregantes através da cultura de anteras. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de reguladores de crescimento na indução de calos e pró-embrióides em anteras de C. arabica L. cv. Catuaí Vermelho LCH-2077-2-5-44. Testou-se primeiramente a inoculação das anteras em meio MS suplementado 2,4-D (2, 4, 6 e 8 mgL-1), TDZ (0 e 0,5 mgL-1) juntamente com época de avaliação (30, 60 e 90 dias). O experimento foi montado no esquema fatorial de 4x2x3 em delineamento de blocos casualizados, e com quatro repetições. Avaliou-se oxidação, intumescimento e calosidade. A utilização somente de 2 mg L-1 2,4-D foi eficiente na indução de calos. Concentrações acima de 4 mgL-1 de 2,4-D inibiram a formação dos calos e quanto maior o período de avaliação, maior a oxidação nas anteras. Posteriormente testaram-se os seguintes tratamentos: 2 mg L-1 2,4-D + 2 mg L-1 BAP; 8 mg L-1Cinetina + 1 mg L-1 AIB; 2 mg L-1 Cinetina + 1 mg L-1 2,4-D; 2 mg L-1 Cinetina + 20 mg L-1 GA3; 2 mg L-1 2,4-D + 0,5 mg L-1 TDZ; 2 mg L-1 ANA e 2 mg L-1 2,4-D. O experimento foi em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 7x2 (composição dos reguladores x épocas de cultivo in vitro) com quatro repetições. Após 30 e 60 dias de cultivo in vitro avaliou-se contaminação, oxidação, intumescimento, formação de calos e presença ou não de pró-embrióides. As combinações de reguladores 2 mg L-1 2,4-D + 2 mg L -1BAP, 2 mg L-1 Cinetina + 1 mg L-1 2,4-D, 2 mg L-1 2,4-D + 0,5 mg L-1 TDZ e 2 mg L-1 2,4-D proporcionaram a formação de calos. A calosidade foi favorecida aos 60 dias de cultivo in vitro. As combinações 2 mg L-1 2,4-D + 2 mg L-1 BAP, 2 mg L-1 Cinetina + 1 mg L-12,4-D, 2 mg L-1 2,4-D + 0,5 mg L-1 TDZ proporcionaram a indução de pró-embrióides.
Abstract
The improvement of coffee (Coffea arabica) has been done through conventional methods, which are very cumbersome to obtain the desired genetic material, and this time can be reduced through the acquisition of haploid in segregating generations through the culture of anthers. This study analyzed the effect of growth regulators on C. arabica L. cv. Catuaí Vermelho LCH-2077-2-5-44 anther callus and pro-embryoid induction. First, anther inoculation on MS medium supplemented with 2,4-D (2, 4, 6 or 8 mgL-1), TDZ (0 or 0.5 mgL-1) was evaluated, together with evaluation time (30, 60 or 90 days). The experimental design was as a 4x2x3 factorial in randomized blocks and with four repetitions. Oxidation, intumescences and callosity were evaluated. The use of 2 mgL-1 2,4-D alone was effective for callus induction. High concentrations of 2,4-D inhibited callus formation and the longer the evaluation period, the greater was anther oxidation. Subsequently, the following treatments were evaluated: 2 mg L-1 2,4-D + 2 mg L-1 BAP; 8 mg L-1 Kinetin + 1 mg L-1 AIB; 2 mg L-1 Kinetin + 1 mg L-1 2,4-D; 2 mg L-1 Kinetin + 20 mg L-1 GA3; 2 mg L-1 2,4-D + 0.5 mg L-1 TDZ; 2 mg L-1 ANA or 2 mg L-1 2,4-D. The experimental design was completely randomized, as a 7x2 (regulator composition x in vitro cultivation time) factorial with four replications. After 30 and 60 days in vitrocultivation, contamination, oxidation, intumescences, callus formation with the presence of pro-embryoid or not were evaluated. The combinations of regulators 2 mg L-1 2,4-D + 2 mg L -1 BAP, 2 mg L-1 Kinetin + 1 mg L-1 2,4-D, 2 mg L-1 2,4-D + 0.5 mg L-1 TDZ e 2 mg L-1 2,4-D induced callus formation. Callosity was favored after 60 days of in vitro cultivation. The combinations 2 mgL-1 2,4-D + 2 mgL-1 BAP, 2 mgL-1 Kinetin + 1 mgL-1 2,4-D, 2 mgL-1 2,4-D + 0.5 mgL-1 TDZ induced pro-embryoid formation.
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SILVA, A. S. et al. Diferentes reguladores de crescimento na indução de calos e pró-embrióides em anteras cafeeiro. Bioscience Journal, Uberlândia, v. 25, n. 4, p. 19-27, July/Aug. 2009.