dissertação

Detecção de genes do Sistema de Secreção do Tipo III em Aeromonas hydrophila e sua relação com a virulência em tilápia do Nilo

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS

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Programa de Pós-Graduação

DMV - Programa de Pós-graduação
Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias

Agência de fomento

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Laboratório de Doenças de Animais Aquáticos (AQUAVET)

Tipo de impacto

Áreas Temáticas da Extenção

Objetivos de Desenvolvimento Sustentável

Dados abertos

Resumo

Aeromonas hydrophila é uma bactéria patogênica para diversos hospedeiros dentre eles estão os seres humanos e os peixes O sistema de secreção do tipo III (T3SS) tem sido relatado como um dos mais importantes fatores de virulência para bactérias Gram negativas incluindo A. hydrophila Neste estudo protocolos de PCR foram desenvolvidos para detectar os genes do T3SS ascV e aopB e utilizados para avaliação da freqüência em isolados de peixes doentes e de ambientes da aquicultura Foi avaliada também a relação da presença dos genes com a virulência da bactéria em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) Os protocolos de PCR desenvolvidos possilitaram a determinação de três perfis diferentes entre os isolados: ascV+/aopB+ ascV+/aopB- e ascV-/aopB- A freqüência de 62.5% do perfil ascV+/aopB+ em isolados de peixes doentes foi significativamente diferente (P < 005) da freqüência de 32.5% em amostras de casos ambientais Os resultados obtidos nos ensaios in vivo demonstraram uma taxa de mortalidade mais alta em grupos de peixes desafiados com bactérias ascV+/aopB+ que desafiados com ascV-/aopB- e ascV+/aopB- Os resultados obtidos nas análises de freqüência e ensaios in vivo indicam que o perfil ascV+/aopB+ potencializa a virulência bacteriana Os protocolos de PCR aqui estabelecidos se mostraram eficientes e específicos para detecção de genes do T3SS podendo ser utilizados para tipagem da bactéria A. hydrophila

Abstract

Aeromonas hydrophila is a bacterium which can cause diseases in several hosts such as humans and fish The type three secretion system (T3SS) has been reported as one of major virulence factor in Gram negative bacteria including the fish pathogen A hydrophila The aims of this study were to develop PCR systems to detect ascV and aopB genes from the T3SS to evaluate their frequency in A. hydrophila strains isolated from diseased fish and aquaculture environment and the relation between T3SS presence and virulence to Nile tilapia The PCR developed here was useful to detect the target genes showing three different profiles among the strains ascV+/aopB+ ascV+/aopB- e ascV-/aopB- Higher frequency of ascV+/aopB+ was verified in isolates from diseased fish than aquaculture environment (P < 005) Among 64 isolates from diseased fish ascV+/aopB+ (62.5%) was the most frequent profile (P < 005) and promoted more intensive mortality rates Environmental strains with ascV+/aopB+ profile were less virulent than isolates from clinical cases This result suggests that the presence of functional T3SS probably improves the A hydrophila virulence The PCR assay showed to be a specific and efficient tool for detection of T3SS and this technique can be used for typing A. hydrophila isolates

Descrição

Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, área de concentração em Ciências Veterinárias, para a obtenção do título de Mestre.

Área de concentração

Ciências Veterinárias

Agência de desenvolvimento

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Impacto da pesquisa

Resumen

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DOI

Citação

CASTRO, G. dos A. C. Detecção de genes do Sistema de Secreção do Tipo III em Aeromonas hydrophila e sua relação com a virulência em tilápia do Nilo. 2009. 38 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2009.

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