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“Sítios frágeis” espontâneos e induzidos nos cromossomos de espécies do complexo Lolium-Festuca
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Universidade Federal de Lavras
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Departamento de Biologia
Programa de Pós-Graduação
Programa de Pós-Graduação em Genética e Melhoramento de Plantas
Agência de fomento
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Tipo de impacto
Áreas Temáticas da Extensão
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável
Dados abertos
Resumo
Os sítios frágeis são considerados regiões fracas do genoma e podem ser
propensos a sofrer lesões ou quebras cromossômicas sendo relacionados à
instabilidade no genoma de humanos, outros mamíferos, peixe e leveduras.
Em plantas, esses sítios têm sido descritos em algumas espécies de
gramíneas como por exemplo no gênero Lolium, ocorrendo nos sítios de
rDNA 45S. Contudo, as consequências dos sítios frágeis para o genoma de
plantas ainda não são bem conhecidas. Dessa forma, os objetivos deste
trabalho foram avaliar a estabilidade do genoma das espécies do
complexo Lolium-Festuca com expressão espontânea de SFs e
mediante a indução de quebras cromossômicas por irradiação
ionizante e verificar se o genoma se recupera dessas quebras induzidas
através da síntese de novos telômeros. Para verificar se havia instabilidade
foram analisados o ciclo celular, a quantidade de DNA por citometria de
fluxo, a formação de novos centrômeros através de imunolocalização e a
existência de fibras de cromatina conectando o cromossomo e o fragmento
através do uso da técnica de YOYO e FISH com sondasde rDNA 45S na
espécies do complexo Lolium-Festuca. Para verificar as quebras
cromossômicas induzidas por raio-X foi utilizada a técnica de FISH com
sondas de rDNA 45S e telomérica e quantificadas as anormalidades
cromossômicas. Os resultados mostraram que as regiões fragilizadas nos
sítios de rDNA 45S não apresentam atividade neocentromérica apresentam
fibras de cromatina finas e longas, não visíveis com coloração DAPI,
conectando os fragmentos acêntricos aos cromossomos de origem, não
promovendo a instabilidade no genoma dessas espécies. O mesmo foi
observado para a espécie de F. arundinaceae híbridos Festulolium. Os sítios
frágeis não representam regiões propícias à quebrasapós a irradiação com
raio-X e não foi detectada a formação de novos telômeros durante o período
de avaliação das c-metáfases.
Abstract
The fragile sites (FSs) are considered weak regions of the genome and may
be prone to form lesions or chromosomal breaks in addition to being related
to instability in the human genome, other animals, fish, and yeast. In plants,
these sites have been described in some species of grasses such as the genus
Lolium, taking place in the sites of 45S rDNA. However, the consequences
of fragile sites in the genome of plants are not well-known. Thus, the aims of
this study were to evaluate if there is instabilityin the genome of species of
Lolium-Festuca complex with spontaneous expression of FSs and through
the induction of chromosomal breaks by ionizing radiation and also to check
if the genome is recovering from these induced breaks through the synthesis
of new telomere. The results showed that the weakened regions in 45S
rDNA sites does not present neocentromeric activity, but showed thin and
long chromatin fibers, not visible with DAPI staining, connecting the
acentric chromosome fragments to chromosome region containing the
centromere, not promoting instability in the genome of these species. The
same was observed for the species of F. arundinaceae Festulolium hybrids.
Fragile sites are not regions prone to breaks afterirradiation with X-ray and
there was no formation of new telomeres during the evaluation of cmetaphase.
Descrição
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Impacto da pesquisa
Resumen
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DOI
Citação
ROCHA, Laiane Corsini. Sítios frágeis espontâneos e induzidos nos cromossomos de espécies do complexo Lolium-Festuca. 2015. 86 p. Tese (Doutorado em Genética e Melhoramento de Plantas)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2015.
