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Uso de PCR Duplex para detecção dos genes femA e mecA e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) em Staphylococcus aureus isolados de leite cru
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Resumo
O objetivo deste trabalho foi de identificar Staphylococcus aureus e as linhagens resistentes à meticilina
(MRSA) em amostras de leite cru bovino, por meio de métodos moleculares, e de determinar a
concentração inibitória mínima (CIM) dos isolados. S. aureus pode apresentar linhagens resistentes à
meticilina e a outros antimicrobianos utilizados na prática médico-veterinária. Foram analisadas 251
amostras de leite cru de tanques de expansão, procedentes de cinco mesorregiões produtoras de leite de
Minas Gerais – Brasil. Por meio de PCR foi identificada a presença do gene femA em 278 isolados de
S. aureus; e as linhagens MRSA foram determinadas pela presença do gene mecA. Os ensaios de PCR foram
positivos para gene femA em 100 % dos isolados testados; e entre essas amostras 11 (3,95 %) apresentaram
produto amplificado de 533 pb correspondente ao gene mecA. Para analisar a susceptibilidade dos isolados
foi realizado o teste de CIM para nove substâncias antimicrobianas. Foram identificados 149 isolados de
S. aureus que apresentaram CIM≤ 4 µg/mL para enrofloxacina, com 92,54 % de susceptibilidade, e 55
isolados testados para sulfametoxazol+trimetoprima, apresentaram CIM ≤ 2 µg/mL com 83,33 % de
susceptibilidade. Estes antimicrobianos foram considerados os mais eficazes.
Abstract
This study identified Staphylococcus aureus and the methicillin-resistant (MRSA) strains in raw milk
samples using molecular methods, and their minimum inhibitory concentrations (MIC) were evaluated.
Two hundred fifty-one samples of raw milk samples from bulk tanks, collected in the state of Minas
Gerais, Brazil were analyzed using polymerase chain reaction (PCR) to investigate the presence of femA
gene in 278 S.aureus isolates. Furthermore, MRSA strains were investigated for detecting mecA gene. All
of 278 isolates contained the femA gene (132 bp), and in 11 samples (3.95 %) the mecA gene (533 bp) was
identified. The minimum inhibitory concentration against S. aureus was determined using enrofloxacin,
trimethoprim-sulfamethoxazole, gentamicin, azithromycin, tetracycline, cephalothin, amoxicillin,
penicillin G and lincomycin. Enrofloxacin and trimethoprim-sulfamethoxazole showed to be the most
effective inhibitors, as this study identified 149 of 161 isolates (92.5 % of susceptibility) with MIC≤ 4 mg/
mL, and 55 of 66 isolates (83.3 % of susceptibility) with MIC≤ 2 mg/mL, for the first antimicrobial drug
and the second one, respectively.
Descrição
Área de concentração
Agência de desenvolvimento
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Resumen
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TEIXEIRA, J. P. et al. Uso de PCR Duplex para detecção dos genes femA e mecA e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) em Staphylococcus aureus isolados de leite cru. Revista do Instituto Adolfo Lutz, [S.l.], v. 73, n. 3, p. 272-279, 2014.