dissertação
Atividade antibacteriana in vitro e potencial cicatrizante in vivo de extratos de casca de jabuticaba
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Universidade Federal de Lavras
Faculdade, Instituto ou Escola
Departamento
Departamento de Química
Programa de Pós-Graduação
Programa de Pós-Graduação em Agroquímica
Agência de fomento
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)
Tipo de impacto
Áreas Temáticas da Extenção
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável
Dados abertos
Resumo
Um dos maiores problemas de Saúde Pública enfrentados é o agravamento da resistência a
antimicrobianos. A casca de jabuticaba é rica em compostos fenólicos (CF), que são
substâncias que apresentam atividade antimicrobiana (AA). Neste estudo, avaliou-se a AA de
extratos fenólicos, obtidos de diferentes formas, de farinha de casca de jabuticaba (FCJ).
Quantificaram-se os CF por cromatografia líquida de alta eficiência nos extratos e estudou-se
a ação do extrato na cicatrização de feridas em ratos. Os CF foram extraídos da FCJ
utilizando-se quatro formas diferentes de extrações, resultando em quatro extratos: aquoso,
metanólico, etanólico e acetônico. Para a avaliação bactericida in vitro foram utilizados quatro
patógenos bacterianos (Staphylococcus aureus GL 5674, Staphylococcus aureus GL 8702,
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e Listeria monocytogenes ATCC 19117),
empregando o método de concentração mínima bactericida (CMB) pela microdiluição em
caldo e análise do crescimento de colônias, com as seguintes concentrações dos diferentes
extratos (%): 5,00; 2,50; 1,25; 0,63, 0,32, 0,16, 0,08, determinando-se a CMB. Para o teste in
vivo foram utilizados 24 ratos da linhagem Wistar, machos, com 60 dias de idade, pesando
aproximadamente 140 g. As feridas foram feitas na região dorsocervical de cada animal. Os
animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos, com 6 ratos cada: o grupo I -controle positivo, tratado com Bactrovet®, contendo 0,580 mg de sulfadiazina de prata mL
-1
;
grupo II - tratado com solução aquosa do extrato etanólico liofilizado da FCJ (EE) a 10%,
contendo 0,300 mg de CF mL
-1
; grupo III - tratado com solução aquosa do EE a 5%, contendo
0,150 mg de CF mL
-1
e o grupo IV - tratado com solução aquosa do EE a 2,5%, contendo
0,075 mg de CF mL
-1
. Nas feridas foram instiladas diariamente no mesmo horário, 50 µL de
Bactrovet® e 50 µL das soluções do EE de cada concentração. Em relação à AA, o extrato
aquoso não inibiu o crescimento de nenhuma bactéria. Já os extratos etanólico, acetônico e
metanólico inibiram o crescimento de todas as bactérias testadas nas concentrações de 1,25%,
2,50% e 5,00%, respectivamente. O extrato etanólico foi o que apresentou maior atividade
bactericida, tanto para bactérias Gram positivas como para Gram negativas. Este potencial
pode ser atribuído às substâncias presentes no extrato, como os CF, sobretudo, os taninos
catequina, epicatequina e galato de epicatequina, que foram majoritários no extrato etanólico,
podendo justificar sua maior ação bactericida. Observou-se que ocorreu diminuição da área
das feridas, ao longo do tempo, para os quatro grupos, entretanto, a cicatrização ocorreu de
forma mais lenta para o grupo controle e entre os grupos tratados com EE a cicatrização foi
mais rápida na seguinte ordem: grupo tratado com EE 2,5% > 5% > 10%. Quanto à análise do
processo de cicatrização do ponto de vista clínico e macroscópico, conclui-se que o uso do
EE, principalmente, nas concentrações de 5% e 2,5% apresentaram influência positiva na
cicatrização de feridas cutâneas em ratos, por promover reação inflamatória menos intensa e
fechamento mais rápido das feridas, podendo ser explorado pela indústria farmacêutica.
Abstract
One of the main problems faced in Public Health is the antimicrobial resistance aggravation.
The jabuticaba skin is known by containing phenolic compounds (PC), which are substances
that display antimicrobial activity (AA). In this study it was evaluated t he AA from phenolic
compounds, obtained different methods from the jabuticaba skin meal (JSM). The phenolic
compounds were quantified by high performance liquid chromatography, and it was studied
their action on upon mice wound healing process. The PC were extracted from JSM using
four different extraction methods, resulting in four extracts: aqueous, methanolic, ethanolic
and acetonic. For antimicrobial activity in vitro, it was chosen four pathogenic bacterial
strains (Staphylococcus aureus GL 5674, Staphylococcus aureus GL 8702, Pseudomonas
aeruginosa ATCC 27853 and Listeria monocytogenes ATCC 19117), employing the
minimum bactericidal concentration (MBC) by broth microdilution. Further, it was analyzed
the growth of bacterial colonies in different extract concentration (%): 5.00; 2.50; 1.25; 0.63,
0.32, 0.16, 0.08, determining its MBC. For the in vivo test, it was used 24 male Wistar rats,
with 60 days of age, weighing an average of 140 g. Wounds were made on the dorsocervical
area of each animal. After this procedure, the rats were randomically arranged into four
groups, with six rats each: group I - positive control group, treated with Bactrovet®,
containing 0.580 mg of silver sulfadiazine mL
-1
; group II - treated with aqueous solution of
the lyophilized JSM ethanolic extract at 10% containing 0.300 mg of PC mL
-1
; group III -treated with aqueous solution of EE at 5% containing 0.150 mg of PC mL
-1
and the group IV -treated with aqueous solution of EE at 2.5% containing 0.075 mg of PC mL
-1
. The wound site
were daily instilled at the same hour with 50 µL of Bactrovet® or 50 µL of EE in different
concentrations. Regarding the AA, the aqueous extract were not able to inhibit none of the
bacterial strains. However, the ethanolic, acetonic and methanolic extracts inhibited the
bacterial growth of all tested strains at the concentration of 1.25%, 2.50% and 5.00%,
respectively. The ethanolic extract had the best antimicrobial activity against Gram-positive
and negative strains. This potential was attributed to the phytochemicals present in the extract,
such as PC, in special catechin, epicatechin and epicatechin gallate, which were the main
phenolic compounds found in ethanolic extract, justifying its antimicrobial action. It was
observed a progressive reduction on the wound size, the data obtained showed that the group
control had a slower recovery in comparison the group treated with the extracts. The extract
effectiveness were in the following order, 2.5% > 5% > 10%. Regarding the morphological
and microscopic aspect of the wound, it was concluded that the use of the EE, especially at
5% and 2.5%, had a positive relation with rats cutaneous wound healing, by promoting a less
intense inflammatory reaction and a quicker wound closure, a potential that could be explored
by pharmaceutical industries.
Descrição
Área de concentração
Agência de desenvolvimento
Palavra chave
Marca
Objetivo
Procedência
Impacto da pesquisa
Resumen
ISBN
DOI
Citação
MACHADO, G. H. A. Atividade antibacteriana in vitro e potencial cicatrizante in vivo de extratos de casca de jabuticaba. 2017. 83 p. Dissertação (Mestrado em Agroquímica)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2017.
