dissertação

Motilidade espermática de sêmen de peixes criopreservado em diferentes meios avaliada por método subjetivo e computadorizado

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Resumo

A pirapitinga (Piaractus brachypomus) e a curimba (Prochilodus lineatus) são espécies de peixe da ordem Characiforme, de importância econômica e ecológica. Os objetivos do presente estudo foram (a) avaliar diferentes meios de congelamento para o sêmen de ambas as espécies; (b) comparar a motilidade espermática após o descongelamento avaliada pelo método subjetivo ao microscópio de luz, bem como pelo método computadorizado SCA®, em ambas as espécies; (c) determinar as velocidades espermáticas após o descongelamento pelo método computadorizado SCA®, em ambas as espécies e; (d) estabelecer uma correlação entre as velocidades espermáticas e a taxa de fertilização para a curimba. O sêmen de pirapitinga foi diluido em quatro meios de congelamento preparados com dois diluidores (glicose e BTS®) combinados a dois crioprotetores (metilglicol e DMSO) e congelado em vapor de nitrogenio. O sêmen foi descongelado, a motilidade espermatica foi avaliada tanto subjetivamente no microscópio de luz quanto objetivamente pelo sistema computerizado SCA® e as velocidades curvilinear (VCL), média na trajetória (VAP) e linear (VSL) foram calculadas. O sêmen de curimba foi diluido em dois meios de congelamento preparados com dois diluidores (glicose e ACP®) combinados ao crioprotetor metilglicol e congelado em vapor de nitrogênio. Metade das palhetas foi avaliada quanto à motilidade e velocidades espermaticas, como descrito para a pirapitinga. A outra metade das palhetas foi avaliada quanto à capacidade de fertilizar ovócitos frescos de três fêmeas. Tanto na pirapitinga quanto na curimba, não houve diferença significativa entre a motilidade espermática avaliada subjetivamente ou pelo sistema computadorizado. Em pirapitinga, o sêmen congelado em glicose-metilglicol apresentou as maiores taxas de motilidade (81%) e as maiores velocidades, quando comparadas às amostras congeladas nos outros meios. Em curimba, as amostras criopreservadas em ACP® apresentaram maior motilidade espermática (84%), em relação às amostras criopreservadas em glicose (75%); entretanto, a taxa de fertilização e as velocidades espermáticas foram semelhantes para o sêmen criopreservado nos dois diluidores. Foram encontradas correlações positivas entre a taxa de fertilização e as velocidades espermáticas. O crioprotetor metilglicol foi mais eficiente do que o DMSO para o sêmen de pirapitinga, conforme observado em outros Characiformes. A glicose é um diluidor bastante simples, de fácil acesso em farmácias e drogarias, e, combinado ao metilglicol, é um excelente meio de congelamento para ambas as espécies estudadas.

Abstract

Pirapitinga (Piaractus brachypomus) and curimba (Prochilodus lineatus) are Characiforme fish species, of economic and ecological importance. The aims of this study were to (a) evaluate different freezing media for semen of both species; (b) compare post-thaw sperm motility subjectively evaluated under light microscope and computerized system SCA® for both species and (c) determine post-thaw sperm velocities by SCA® for both species and; (d) establish a correlation between the sperm velocities and the fertilization rates for curimba. Pirapitinga semen was diluted in four freezing media prepared with two extenders (glucose and BTS®) combined with two cryoprotectants (methylglycol and DMSO) and frozen nitrogen vapor. Semen was thawed, sperm motility was evaluated both subjectively under light microscope and objectively by computer system SCA® and the curvilinear velocity (VCL), average path (VAP) and straight line (VSL) were calculated. Curimba semen was diluted in two semen extenders (ACP® and glucose) combined with methylglycol as cryoprotectant and frozen in nitrogen vapor. Half of the samples were evaluated for motility and sperm velocity, as described for pirapitinga. The other half was evaluated for the capacity to fertilize fresh oocytes from three females. In both pirapitinga and curimba, there was no difference in post-thaw sperm motility evaluated either subjectively or by computer system. In pirapitinga, semen cryopreserved in glucose-methylglycol yielded higher motility (81%) and velocities compared to semen cryopreserved in the other media. In curimba, semen cryopreserved in ACP® yielded higher motility (84%) than semen cryopreserved in glucose (75%), however fertilization rates and sperm velocities were similar among samples cryopreserved in both extenders. A positive correlation was observed between fertilization rate and sperm velocity. The cryoprotectant methylglycol was more efficient than DMSO for pirapitinga semen, as observed in other Characiformes. Glucose is a simple extender, available in drugstores and, combined with methylglycol, is an excellent freezing medium for semen of both fish species studied here.

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Ciências Veterinárias

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NASCIMENTO, A. F. Motilidade espermática de sêmen de peixes criopreservado em diferentes meios avaliada por métodos subjetivo e computadorizado. 2008. 45 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2008.

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