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Estratégias para conservação in vitro de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla

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Programa de Pós-Graduação

Programa de Pós-graduação em Biotecnologia Vegetal

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Áreas Temáticas da Extenção

Objetivos de Desenvolvimento Sustentável

Dados abertos

Resumo

Neste trabalho, testou-se a eficiência de diferentes técnicas de conservação em brotos e ápices caulinares de um genótipo de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla com grande importância econômica na silvicultura comercial. A primeira técnica utilizada foi o crescimento lento em que os brotos foram submetidos a tratamentos com 4°C e 8°C em meio MS suplementado com reguladores de crescimento contendo 0,09 M; 0,13 M e 0,18 M de sacarose, nas condições de claro e escuro. Porém não houve eficiência na regeneração das plantas quando submetidas aos tratamentos. Outra técnica avaliada foi a criopreservação e para isso utilizou-se duas metodologias, a Droplet-vitrification e a Crioplaca com diferentes tempos de exposição ao PVS2, sendo que esta última testada pela primeira vez em um genótipo de eucalipto. O tratamento que se mostrou mais eficiente no processo de criopreservação foram as Crioplacas de alumínio que com 60 minutos de exposição ao PVS2 atingiram eficiência de 47,4% de regeneração nos ápices criopreservados. Os tratamentos utilizando Droplet-vitrification obtiveram resultados inferiores com no máximo 25% de regeneração. Quanto à multiplicação de brotos, as duas metodologias apresentaram padrões normais de multiplicação após a criopreservação. Além da metodologia aplicada à criopreservação, testou-se dois tipos de crioprotetores, PVS2 e VSL em Crioplacas. Ambos apresentaram porcentagens similares de regeneração (41,8% PVS2 e 45,7% VSL) porém em tempos diferentes (60 minutos PVS2 e 75 minutos VSL). A partir dos resultados obtidos conclui-se que todos os tratamentos realizados para a conservação de brotos à médio prazo via crescimento lento foram ineficazes. Já a conservação de ápices caulinares à longo prazo via criopreservação pelo procedimento V-Crioplaca é mais eficiente que a Dropletvitrification. A utilização da Crioplaca com o crioprotetor PVS2 por 60 minutos ou VSL durante 75 minutos são as metodologias mais eficazes para criopreservação do genótipo estudado.

Abstract

In this work, it was evaluated the efficiency of different in vitro conservation techniques for shoots and caulinar apices from Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla hybrid, a species with great economic relevance to the commercial forestry. The slow growth was the first technique used at which the shoots were submitted to two temperatures (4 °C and 8 °C) while cultured in MS medium supplemented with plant growth regulators and sucrose (0.09 M; 0.13 M and 0.18 M), under light and dark conditions. However, there was no plant regeneration coming from shoots after these treatments. Another technique tested was the cryopreservation by using two methodologies: the Droplet -vitrification and the Cryo-plate (used for the first time in eucalyptus genotype) with different exposure times to the cryoprotectant PVS2. The most effective treatment for cryopreservation of apices was the aluminium cryo-plate exposed for 60 minutes to PVS2, exhibiting 47.4% efficiency on the regeneration of cryopreserved apices. The treatments undergone to Dropletvitrification technique presented inferior results with regeneration rate up to 25%. For the shoot multiplication, both methodologies led to normal multiplication patterns after the cryopreservation. In addition to the cryopreservation methodologies, other two types of cryoprotectants were applied: PVS2 and VSL in Cryo-plate. They presented similar regeneration rates (41.8% PVS2 and 45.7% VSL), but at different times (60 minutes for PVS2 and 75 minutes for VSL). Taking these results into account is possible to conclude all treatments carried out to conserve the shoots through slow growth were inefficient in a medium-term. On the other hand, the conservation of caulinar apices by using Cryo -plates during cryopreservation process is more efficient than Droplet-vitrification in a long-term. Lastly, the Cryo-plate use with the cryoprotectants PVS2 for 60 minutes or VSL for 75 minutes is the most efficacious methodology for the studied -genotype cryopreservation.

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BALIEIRO, F. P. Estratégias para conservação in vitro de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. 2018. 69 p. Tese (Doutorado em Biotecnologia Vegetal)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2017.

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