dissertação

Identificação de progênies indutoras de haploidia em milho usando diferentes estratégias

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Resumo

Na cultura do milho, o sucesso de um programa de melhoramento depende do desenvolvimento de linhagens elites para a produção dos híbridos. Uma alternativa para melhorar a eficiência dos programas de melhoramento, de forma a reduzir custos e tempo na produção de linhagens, é a utilização da tecnologia duplo haploide. O sucesso da produção de linhagens duplo haploide, depende de elevadas taxas de indução e da identificação eficiente dos reais haploides. O sistema in vivo de indução de haploidia, se tornou a maior ferramenta na produção de haploides na cultura. O objetivo deste estudo foi recombinar as progênies indutoras de haploidia do programa de genética e melhoramento de plantas da UFLA, selecionar as progênies com maiores porcentagens de indução, identificar haploides pelo marcador morfológico R-navajo e por citometria de fluxo, e também verificar se é possível identificar indivíduos indutores de haploidia utilizando marcadores moleculares. Os experimentos foram realizados em Lavras-MG. Na safra 2017/18 foram recombinadas e autofecundadas progênies S2:5. Os indutores foram cruzados com os híbridos simples P30F90, MG580, 2B810, 30A37, 2B640, 2A620, 2A401. As sementes obtidas foram avaliadas em relação ao marcador morfológico, 196 sementes com endosperma roxo e embrião branco foram selecionadas como possíveis haploides. As sementes selecionadas como possíveis haploides foram germinadas em casa de vegetação e submetidas à citometria de fluxo visando a confirmação da ploidia. O cálculo das taxas de indução foi feito considerando os haploides confirmados pela citometria de fluxo. O DNA de 48 progênies foi extraído, submetido a PCR e observado em gel de agarose a 1%. Nenhum fragmento foi amplificado pelo primer. Observou-se que a manifestação fenotípica do marcador morfológico R1-navajo não é precisa. Portanto, são necessários estudos e aprimoramento das metodologias utilizadas na identificação dos indivíduos haploides de forma a garantir resultados mais precisos sobre as taxas de indução.

Abstract

In maize, the success of a breeding program depends on the development of elite lines for the production of hybrids. An alternative to improving the efficiency of improvement programs, in order to reduce costs and time in the production of lines, is the use of double haploid technology. The success of double haploid lines production, depends on high induction rates and efficient identification of the true haploids. The in vivo haploid induction system, has become the major tool in haploid production in the crop. The objective of this study was to recombine the haploid inducers progenies of UFLA’s plant breeding and genetics program, to select the progenies with the highest percentages of induction, to identify haploids by the R-Navajo morphological marker and by flow cytometry , and also to verify if it is possible to identify individuals inducers haploid using molecular markers. The experiments were carried out in Lavras-MG. In the 2017/18 crop, S2: 5 progenies were recombined and self-fertilized. Inducers were crossed with the single hybrids P30F90, MG580, 2B810, 30A37, 2B640, 2A620, 2A401. The seeds obtained were assessed in relation to the morphological marker, 196 seeds with purple endosperm and white embryo were selected as possible haploids. The seeds selected as possible haploids were germinated in a greenhouse and submitted to flow cytometry to confirm ploidy. The calculation of induction rates was done considering haploids confirmed by flow citometry. DNA from 48 progenies was extraced, submitted to PCR and observed on 1% agarose gel. No fragment was amplifyed by primer. It was observed that the phenotypic manifestation of the R1-Navajo morphological marker is not precise. Therefore, it is necessary to study and improve the methodologies used to identify haploid individuals in order to ensure more accurate results on in-duction rates.

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RODRIGUES, P. K. B. Identificação de progênies indutoras de haploidia em milho usando diferentes estratégias. 2019. 41 p. Dissertação (Mestrado em Genética e Melhoramento de Plantas)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2019.

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