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Caracterização de eventos imunopatológicos em sistema nervoso central de caprinos naturalmente infectados por Neospora caninum

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Resumo

Neste estudo foram avaliadas as lesões microscópicas e a resposta imunológica celular no sistema nervoso central (SNC) de dez fetos caprinos provenientes de abortos e de sete caprinos machos, jovens e adultos. Para este propósito, foi realizada a marcação imuno-histoquímica, com os anticorpos anti CD3, CD79α, GFAP, MHC-II, Lectinoistoquímica RCA1, além do marcador de antígeno nuclear de células em proliferação (PCNA). As lesões encontradas nos fetos consistiram de áreas de necrose multifocais, circundadas por células da glia e de manguitos perivasculares, que se concentravam, principalmente, em regiões de córtex cerebral, tálamo e tronco encefálico. Estas lesões estavam ou não relacionadas à presença de estruturas parasitárias. No sistema nervoso central dos caprinos jovens e adultos, foram encontradas lesões semelhantes em quatro dos seis caprinos positivos para N. caninum e, em dois destes, as lesões eram acentuadas, apesar destes animais não manifestarem sinais clínicos. Em três caprinos adultos, ainda, foram encontradas poucas células gigantes, relacionadas às lesões. A presença do parasito foi avaliada, por meio de análise de histopatologia, imuno-histoquímica e pela reação em cadeia da polimerase (PCR), evidenciando a infecção em sete dos 10 fetos e em seis dos sete caprinos adultos. A marcação imuno-histoquímica das células presentes, nas áreas de gliose, permitiram caracterizá-las como microgliose e astrogliose e afirmar que na infecção por Neospora caninum, em caprinos, fetos e adultos, há uma polarização para a resposta de células de linhagem monocítica (macrófagos e micróglia), com menor participação de astrócitos. Nos fetos, os astrócitos estavam presentes em lesões próximas à substância branca e, nos adultos, a astrogliose estava presente na substância cinzenta de três caprinos representando cicatrizes gliais. Também ocorreu a expressão de moléculas de MHC-II em endotélio e micróglia, principalmente, nos caprinos adultos, provavelmente, estimulada pela presença do parasito no tecido. Neste estudo é descrita a presença de cistos de N. caninum em SNC de caprinos machos adultos, o que não foi demonstrado, até o presente momento, em animais adultos de qualquer espécie e são caracterizados os tipos celulares envolvidos na resposta imunológica no SNC.

Abstract

In this study, we have evaluated the microscopic lesions and cellular immune responses in the central nervous system of seven goat fetuses from abortions by N. caninum and six male, young and adult goats, naturally infected. As a negative control, three fetuses and one adult goat were used. For this purpose immunohistochemical staining with anti CD3, CD79α, GFAP, MHC- II antibodies was performed, RCA1 Lectinhistochemistry, besides the nuclear marker of proliferating cell antigen (PCNA). Lesions found in fetuses consisted of multifocal areas of necrosis surrounded by glial cells and perivascular cuffs that focused mainly in regions of cerebral cortex, thalamus and brainstem. These lesions were either, or not, related to the presence of parasitic structures. In the central nervous system of young and adult male goats, similar lesions were found in four of the six goats positive for N. caninum, although these animals did not manifest any clinical signs. In three adult goats there was also a few multinucleated giant cells associated. The presence of the parasite was assessed by analysis of histopathology, immunohistochemistry and the polymerase chain reaction (PCR) evidencing the infection in seven of 10 fetuses and six of seven adult goats. The immunohistochemical staining of cells in areas of gliosis allowed us to characterize them as astrogliosis and microgliosis in Neospora caninum infections in fetuses and adults; there is a bias towards the response of monocytic lineage cells (macrophages and microglia) with lower participation of astrocytes. In fetuses, astrocytes were present in lesions near the white matter, and adult astrocytic lesions were present in the gray matter of three goats representing glial scars. In addition, there was the expression of MHC-II in endothelium and microglia, especially in adult goats and probably stimulated by the presence of the parasite in the tissue. With this study, we describe the presence of cysts of N. caninum in adult male goats, which has not been demonstrated to date in adult animals of any species and we characterized the cell types involved in the immune response in the CNS of these animals.

Descrição

Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, área de concentração em Ciências Veterinárias, para a obtenção do título de Mestre.

Área de concentração

Ciências Veterinárias

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Citação

COSTA, R. C. Caracterização de eventos imunopatológicos em sistema nervoso central de caprinos naturalmente infectados por Neospora caninum. 2014. 57 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2014.

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