tese
In vivo embryo production in Lacaune ewes collected by transcervical technique
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Universidade Federal de Lavras
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Departamento de Zootecnia
Programa de Pós-Graduação
Programa de Pós-Graduação em Zootecnia
Agência de fomento
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Tipo de impacto
Áreas Temáticas da Extenção
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável
Dados abertos
Resumo
Os programas de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) têm o potencial de
acelerar o melhoramento genético de raças ovinas de interesse produtivo como a Lacaune. O
objetivo geral da tese foi avaliar pontos estratégicos para aumento da eficiência da MOTE
empregando a técnica de recuperação não cirúrgica dos embriões (RNCE) na raça Lacaune.
No primeiro estudo, o interesse zootécnico da raça foi revisado. No segundo estudo, a
avaliação ultrassonográfica da cérvix foi incorporada na rotina de procedimentos de
recuperação não cirúrgica de embriões, avaliando seu potencial em predizer a penetração
transcervical em função do desalinhamento cervical. Dois momentos foram escolhidos para a
realização do exame: (1) 12 h após o início do estro no e (2) 30 min antes da RNCE. A
avaliação no estro foi ineficiente devido a alta incidência de falsos negativos (52%).
Entretanto, na avaliação antes da RNCE, a sensibilidade e especificidade foram 100%,
demonstrando o potencial da ferramenta para a seleção de doadoras. O terceiro estudo avaliou
os efeitos da duração dos protocolos de indução de estro com progestágenos por seis (G-6) ou
(G-9) dias na dinâmica folicular preovulatória, resposta ovulatória e produção de embriões em
ovelhas Lacaune submetidas à RNCE. A taxa de transposição cervical cinco a seis dias após
ovulação foi de 95,2%. Houve maior (P < 0,05) resposta ovulatória (2,9 ± 0,3 vs 1,9 ± 0,3) e
produção de embriões (1,3 ± 0,4 vs 0,4 ± 0,2) em G-9 comparado ao G-6. No quarto estudo,
as ovelhas foram submetidas aos protocolos anteriores, mas foi avaliado a superovulação com
133 mg de FSHp. O G-9 superou o protocolo G-6, apresentando maior (P < 0,05) produção de
embriões após a RNCE (3,5 ± 1,1 vs 1,8 ± 0,7), realizada nos dias 6 e 7 após o estro. Como a
dose de FSHp utilizada foi inadequada para aumentar a resposta SOV e a produção de
embriões, foi realizado um quinto estudo, utilizando o protocolo de nove dias e comparando
as doses de 100 (G-100) e 200 mg (G-200) de FSHp. A dose de 100 mg foi insuficiente para o
recrutamento folicular e houve maior (P < 0,05) resposta SOV em G-200 (11,6 ± 1,2)
comparado ao G-100 (2,6 ± 0,7). A taxa de recuperação de estruturas e o número de embriões
viáveis foram maiores no G-200 (67,8% e 6,9 ± 1,1) comparado ao G-100 (27,6% e
1,0 ± 0,5). No sexto estudo os embriões foram criopreservados por técnicas de congelamento
lento e vitrificação. Após descongelamento/ reaquecimento, os embriões foram usados
aleatoriamente na transferência de embriões em tempo fixo para receptoras sincronizadas.
Embora desafiados aos danos celulares inerentes ao processo de criopreservação, os embriões
recuperados pela RNCE após tratamento de dilatação cervical foram capazes de estabelecer a
prenhez e a parição, mas resultados satisfatórios foram obtidos apenas com a técnica de
congelamento lento (39,4 e 20,9%, respectivamente). A presente tese apresenta resultados que
atestam a viabilidade da realização de programas de múltipla ovulação e transferência de
embriões baseados em recuperação não cirúrgica de embriões em ovelhas da raça Lacaune.
Abstract
Multiple ovulation and embryo transfer (MOET) programs has the potential to accelerate the
genetic improvement of sheep breeds of productive interest such as Lacaune. The general
objective of this thesis was to evaluated strategic points to increase the efficiency of MOTE
applying the non-surgical embryo recovery (NSER) technique following cervical dilation
treatment in Lacaune ewes. In the first study, the zootechnical interest of the breed was
reviewed. In the second, the ultrasonographic cervical evaluation was incorporated in the
routine of procedures aiming NSER, to evaluate its potential to predict the transcervical
penetration by cervical misalignment. Two different times was chosen to perform the exam:
(1) 12 h after estrus onset in the first study and (2) immediately before NSER in the third
study. The evaluating at the estrus was inefficient due to the high incidence of false negatives
(52%). However, the evaluation before NSER, the sensibility and specificity were 100%,
demonstrating the potential of the tool to donors selecting. The third study evaluated the
effects of the duration of progestogen-based estrus induction protocols for six (G-6) or nine
(G-9) days on preovulatory follicular dynamic, ovulatory response and embryo yields in
Lacaune ewes by NSER technique. A rate of 95.2% of transcervical penetration was achieved
5 to 6 days after ovulation. There was higher (P < 0.05) ovulatory response (2.9 ± 0.3 vs
1.9 ± 0.3) and embryo yield (1.3 ± 0.4 vs 0.4 ± 0.2) in G-9 compared to the G-6. In the fourth
study, the ewes were submitted again to 6 and 9-days protocols, but superovulated with the
133 mg of porcine FSH (pFSH). The G-9 outperformed G-6 days protocol, showing higher
(P < 0.05) embryo yield after NSER (3.5 ± 1.1 vs 1.8 ± 0.7) performed on day 6 to 7 after
estrus onset. As the pFSH dose used was inadequate to increase superovulatory (SOV) and
embryo yield responses, it was conducted a fifth study, using the G-9 protocol and comparing
the doses of 100 (G-100) and 200 mg (G-200) of pFSH. The 100 mg dose was insufficient to
recruitment follicular and there were higher (P < 0.05) SOV response in G-200 (11.6 ±1.2)
than in G-100 (2.6 ± 0.7). The structures recovery rate and the number of viable embryos
were higher in G-200 (67.8% and 6.9 ± 1.1) than in G-100 (27.6% and 1.0 ± 0.5). In the sixth
study, the recovered embryos were cryopreserved by either slow freezing (SF) and
vitrification techniques and were randomly used for fixed-time embryo transfer (FTET) to
synchronized recipients. Although challenged to cellular damage inherent in the
cryopreservation process, embryos recovered by NSER after cervical dilation treatment were
able to establish pregnancy and lambing after FTET, but satisfactory results were obtained
only with the SF technique (39.4 and 20.9 %, respectively). The present thesis presents results
that attest the feasibility of carrying out multiple ovulation and embryo transfer programs
based on NSER in Lacaune ewes.
Descrição
Área de concentração
Agência de desenvolvimento
Palavra chave
Marca
Objetivo
Procedência
Impacto da pesquisa
Resumen
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DOI
Citação
FIGUEIRA, L. M. In vivo embryo production in Lacaune ewes collected by transcervical technique. 2020. 149 p. Tese (Doutorado em Zootecnia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2019.